[发明专利]将芦荟色苷A转化成芦荟苦素的方法

说明书

发明背景

本发明涉及将芦荟色苷(aloeresin)A转化成芦荟苦素的方法。

芦荟是已知存在超过300种的肉质植物，大部分是非洲本土的。将来自芦荟的产物用于传统医药中已经有几个世纪了，特别是已经用于皮肤病学的应用中，用于治疗烧伤、疮和其他创伤。现代治疗观察包括抗炎活性、抗肿瘤活性、抗酸活性、抗糖尿病活性、酪氨酸酶抑制活性和抗氧化活性。芦荟产物还广泛用于化妆品和保健食品工业中，尤其是随着近来天然产品流行性的增加。

从其获得药物、治疗、皮肤病学或化妆品应用的主要非洲芦荟种是开普芦荟(Aloe ferox)，一种局限于南部非洲的种。其他种的芦荟也可用于相似的目的。在USA，库拉索芦荟(Aloe vera)广泛用于皮肤护理产品、香波和保健饮料中。然而，已经发现开普芦荟具有几个优于库拉索芦荟的特性。例如，开普芦荟的钙和总氨基酸含量高于库拉索芦荟。栽培的开普芦荟植物的切割叶还产生比生长于其旁边的库拉索芦荟植物多大约20倍的苦汁(重量对重量而言)。因为开普芦荟叶厚宽得多，每个叶片的苦汁总产量甚至更大。从开普芦荟回收的凝胶量以体积计也一向大于从库拉索芦荟获得的。

存在许多分离芦荟特定成分的方法(参见，例如，US专利4,735,935和4,656,029)。芦荟的商业产品之一是从芦荟叶产生的汁液获得的，并且由于其苦味称为芦荟苦味物质(aloe bitters)。汁液通过本领域技术人员已知的传统方法收集并干燥以产生暗棕色的固体物质，称为芦荟苦味物质或Cape Aloes。

商业芦荟苦味物质含有四种主要成分，即芦荟素A、芦荟素B、芦荟苦素和芦荟色苷A。

开普芦荟叶渗出物中主要化合物的总体组成是非常固定的，尤其是考虑到该种的形态变异和广泛的天然分布区域时。在开普芦荟中，芦荟色苷A、芦荟苦素和芦荟素(差向异构体A和B两者)构成总干重的70％至97％，各自以大约4∶3∶2的比例。

通常通过选择性提取从芦荟苦味物质分离芦荟素A和B(或芦荟苷)，其主要用作泻药。芦荟苦素也是从芦荟苦味物质分离的并用作皮肤美白和防晒剂(US专利4,656,029)。通常将芦荟色苷A丢弃。因此，尽管芦荟色苷A以最大量存在于芦荟汁液中，但其具有甚少的或没有商业价值。因此将芦荟色苷A转化成具有更高商业价值的化合物是有利的。

在以下的描述中，任何提及芦荟汁液也旨在提及芦荟苦味物质或芦荟苦味物质的提取物。

发明概述

根据本发明的第一个实施方案，提供了将芦荟色苷A转化成芦荟苦素的方法，该方法包括将至少部分芦荟色苷A水解成芦荟苦素和对香豆酸的步骤。

该方法可以进一步包括将芦荟苦素与对香豆酸分离的步骤。

可以使用酸水解来进行芦荟色苷A水解成芦荟苦素的步骤。

或者，可以使用水解酶来进行芦荟色苷A水解成芦荟苦素的步骤。

在酸水解的情况中，酸可以是任何有机或无机酸。特别地，酸可以是选自盐酸、硫酸、硝酸和磷酸中的一种或多种酸。

在酶水解的情况中，水解酶可以是酯酶、脂酶或蛋白酶。

特别地，水解酶可以选自米曲霉(Aspergillus oryzae)蛋白酶、来自Diversa的ESL001-02^TM，来自Nordisk的NOVO388^TM和来自AltusChiroscreen Kit^TM的米赫毛霉(Mucor miehei)脂酶。更特别地，酶可以是Amano Protease M^TM或来自Quest International的Bioprotease P conc^TM，这两者都是来自米曲霉的蛋白酶。

或者，酶可以是由DNA或氨基酸序列编码的酶，该序列至少实质上对应于上述任一种酶的DNA或氨基酸序列或其部分序列。

酶的DNA或氨基酸序列可以与上述酶的DNA或氨基酸序列具有至少70％的同源性。

酶可以是固体或液体形式。

优选，芦荟色苷A转化成芦荟苦素和对香豆酸而不形成副产物，特别地，不形成聚合物。

芦荟色苷A可以从任何种的芦荟植物获得，特别是来自开普芦荟或库拉索芦荟种，更特别是来自开普芦荟种。

可以从芦荟植物叶产生的汁液获得芦荟色苷A。汁液可以是液体或固体形式。

芦荟色苷A可以是部分纯化的形式。

使用酸时的水解步骤可以在约0.5N至约10N的酸浓度范围内进行，最佳在约2N至约5N酸的浓度下进行。