[发明专利]由植物物种生产葡糖胺

说明书

发明领域

本发明涉及产生植物原料的方法，所述植物原料含有的葡糖胺水平等于或高于0.5％(wt)干物质。

发明背景

葡糖胺的用途

纯葡糖胺在关节疾病中的用途广泛描述于专利和科学文献中，通常与其它化合物和多种天然来源的提取物组合使用。纯葡糖胺作为盐酸葡糖胺或硫酸葡糖胺添加，并来自甲壳类动物水解。例如，WO2000/0074696描述了“治疗关节组织炎症或变性例如关节炎、包含葡糖胺和雷公藤(Trypterygium wilfordii)、女贞(Ligustrum lucidum)和/或光叶丁公藤(Erycibeschmidtii)的草药组合物”，其中将纯葡糖胺与植物制品混合。其他专利涉及作为膳食增补物的植物糖类组合物(EP 1 172 041或EP 923 382)，其中葡糖胺来自几丁质，也就是说，又是来自贝类水解。

在过去的十年中，葡糖胺作为抗骨关节炎剂的用途得到集中发展。推测葡糖胺是对诸如骨关节炎这类关节疾病的唯一活性化合物(直至目前，仅寻找到例如非甾体抗炎药物的症状治疗有效)。

也已显示葡糖胺通过抑制MMP(基质金属蛋白酶)如MMP1、MMP3和MMP13的产生而预防软骨退化。有意义的是，葡糖胺也与皮肤的老化过程有关，皮肤老化主要以弹性的持续丧失和水分损失为特征。皮肤老化反映为重大的结构变化和组成改变。最显著的是，与年轻皮肤相比，老化皮肤中胶原蛋白和葡胺聚糖(glycosaminoglycan)较少。由皮肤产生的葡胺聚糖分子包括透明质酸(聚右旋葡萄糖醛酸-n-乙酰基右旋葡糖胺)、硫酸软骨素及硫酸皮肤素。皮肤细胞产生较高量的透明质酸以应答脱落。透明质酸具有巨大的水合能力。

抑制MMP-1与抑制聚多聚糖/胶原蛋白的降解有关，并因此也与皮肤老化有关：MMP-1可以由紫外线诱导，并被认为是皮肤老化的标志物。US 2002/119107的发明基于选择性抑制MMP-1，要求保护使人类皮肤免于胶原蛋白降解的局部应用组合物。US 2004/037901要求保护抑制皮肤老化影响的不良体征的疗法，包括抑制金属蛋白酶表达的迷迭香植物提取物。

已显示葡糖胺显著改善皮肤干燥和脱落。葡糖胺增加皮肤水分含量并改善皮肤光滑度。这些发现提示，长期摄入葡糖胺对于改善皮肤水分含量和光滑度有效。

已显示含葡糖胺的口服增补物在服用该增补物的一组女性中引起可见皱纹数量的减少(34％)和细纹数量的减少(34％)。使用含葡糖胺、矿物和多种抗氧化剂化合物的口服增补物能够潜在地改善可见皱纹和细纹的外观。

US 6 413 525描述了充分脱落皮肤的方法。具体而言，该发明涉及含有N-乙酰葡糖胺形式的氨基糖的局部应用组合物：当年轻皮肤细胞在脱落后暴露时，它们产生更大量的透明质酸，所述透明质酸是由交替重复的右旋葡萄糖醛酸和N-乙酰右旋葡糖胺分子链组成的葡胺聚糖。已知N-乙酰右旋葡糖胺是活细胞产生透明质酸的限速因素。局部应用葡糖胺有助于透明质酸的持续产生。

在例如JP 59 013 708(软化并湿润皮肤)或美国专利5 866 142(用于脱落皮肤的组合物)中也公开了含有N-乙酰右旋葡糖胺的其它局部应用组合物。

葡糖胺的来源

葡糖胺即2-氨基-2-脱氧右旋葡萄糖，为天然存在的果糖衍生物，并且是糖蛋白及蛋白聚糖的主要成分、许多真核蛋白质的重要组分。它是粘多糖(mucopolysaccharide)和几丁质的主要成分。葡胺聚糖(粘多糖)为掺入到结缔组织、皮肤、腱、韧带和软骨中的大复合物。

葡糖胺的工业来源

工业葡糖胺是由甲壳类动物几丁质(衍生自N-乙酰右旋葡糖胺的复杂糖类)酸水解获得的纯化合物。例如，美国专利6 486 307描述了改进的几丁质酸水解方法：通过将几丁质碾磨至极细的大小，并用浓盐酸进行消化，来生产葡糖胺盐酸盐的方法。

也可以由甲壳类动物酶促水解来产生葡糖胺。例如，美国专利5 998173描述了利用几丁质酶家族的整套酶水解甲壳动物甲壳的几丁质，而由几丁质直接生产N-乙酰右旋葡糖胺的新方法。

保护微生物发酵方法的专利也已有递交，其中培养的微生物生物合成葡糖胺。例如，US 6 372 457描述了利用遗传修饰微生物通过发酵生产葡糖胺的方法和材料。

所有这些方法涉及与甲壳类动物提取物相竞争而生产纯提取葡糖胺。

GB 649 791涉及干燥菊苣(chicory)方面的改进。此专利的方法包括步骤：

-切削菊苣根，