[发明专利]稳定的多肽制剂

说明书

发明的技术领域

本发明涉及一种化学稳定性增强的药物制剂，以及一种在纯化过程中或在药物制剂中提高多肽化学稳定性的方法。

背景技术

多肽在药物制剂的贮藏或生产以及纯化过程中的不稳定性是众所周知的问题。由于大多数多肽相对不稳定的性质，以形成可溶性聚集体(共价二聚体和多聚体)、脱酰胺、氧化、异构化等形式出现的多肽化学不稳定性是已知的难以避免的问题。因此，药物制剂中多肽的化学不稳定性给多肽药物的生产和贮藏带来了显著的问题，减少或消除这种问题对制药工业来说是相当重要的。温度的升高通常会加速这种化学降解产物的形成，因此在分配、贮藏、和使用过程中限制暴露于升高的温度(例如，高出8℃)中对保证多肽药物的质量通常是必要的。因此，病人通常将蛋白质/多肽药物储存在冰箱中来减少其在室温下不可避免的加速化学降解。

在多肽药物的不同化学降解途径中，通常特别受关注的是聚集作用，因为生物学效力降低和潜在的抗原特性与这种聚集形式有关。一些聚集体包含新的共价键的形成，例如通过游离的半胱氨酸残基间二硫键的形成、转酰胺基作用、二酪氨酸形成或甲醛介导的交联(参见Wang，W.Int.J.Pharm.289：1-30，2005)。转酰氨基作用与一个多肽的游离氨基基团(例如N-端)和另一个多肽的酰胺基团(例如天冬酰胺或谷氨酰胺残基)之间的反应有关。Brange和他的同事报道了胰岛素制剂中转酰胺二聚体和多聚体的形成(Brange，J.Pharm Res 9：727-734，1992)。

在胰岛素药物制剂中，与天然的胰岛素分子及其潜在的抗原特性相比，共价二聚体和多聚体的形成显著降低生物学效力，因此它们的减少显得特别重要。所以，针对化学降解，特别是共价二聚体和多聚体的形成，来稳定胰岛素制剂是非常需要的。

为了将纯化过程或药物溶液的pH值稳定在一个理想的pH范围内，向含有多肽的药物溶液中加入缓冲液是必要的。一般来说，磷酸盐缓冲液用作含多肽的药物制剂的优选缓冲剂。

US20030125234公开了由多种带电化合物引起的蛋白质物理稳定性的改变(不溶性聚集体或纤维的形成)，并介绍了乙二胺和胰岛素，但是，在乙二胺的存在时，并没有观察到胰岛素物理稳定性取得显著的积极效果。对本发明的主题化学稳定性(例如可溶性聚集体的形成，如共价二聚体和多聚体)没有进行评价。

发明概述

目前已发现可以通过向所述的制剂中加入作为缓冲剂的乙二胺或其盐获得化学稳定性增强的多肽药物制剂。

因此，一方面，本发明涉及一种含有多肽和乙二胺或其盐以及抗微生物防腐剂的药物制剂。

另一方面，本发明涉及提高纯化过程中多肽稳定性的方法，该方法包含向含有需要纯化的多肽的溶液中加入足量的作为缓冲剂的乙二胺或其盐。

附图说明

图1显示了通过凝胶渗透色谱-HPLC(GPC-HPLC)分析得到的含有乙二胺二盐酸盐或磷酸盐作为缓冲液的组合物中多肽(门冬胰岛素)的化学稳定性的结果，以37℃下经3个月贮藏后测得的高分子量蛋白质的相对含量(％HMWP)表示。

图2显示了通过反相HPLC(RP-HPLC)分析得到的含有二盐酸乙二胺或磷酸盐作为缓冲液的组合物中多肽(门冬胰岛素)的化学稳定性的结果，以37℃下经3个月贮藏后测得的相关杂质的相对含量表示。

图3显示了通过凝胶渗透色谱-HPLC(GPC-HPLC)分析得到的含有0.007mM-14 mM的二盐酸乙二胺或7mM磷酸盐作为缓冲液的组合物中多肽(门冬胰岛素)的化学稳定性的结果，以37℃下测得的高分子量蛋白质的相对形成率(％HMWP)表示。

图4显示了通过反相HPLC(RP-HPLC)分析得到的含有0.007mM-14mM的二盐酸乙二胺或7mM磷酸盐作为缓冲液的组合物中多肽(门冬胰岛素)的化学稳定性的结果，以37℃下测得的相关杂质的相对形成率表示。