[发明专利]蛋白纯化方法

权利要求书

1.一种纯化靶蛋白群的方法，包括以下步骤：

(a)使包含至少95％靶蛋白群和至多5％污染蛋白的样品与包括至少 100种不同结合部分的库接触，其中所述结合部分的量足以结合污染蛋 白和少量的所述靶蛋白群；

(b)使所述污染蛋白和所述少量的靶蛋白群与所述结合部分库结合；

(c)使未结合的靶蛋白群与结合至所述结合部分库的所述污染蛋白 和靶蛋白群分离；以及

(d)从所述样品收集所述未结合的靶蛋白群；

由此所收集的靶蛋白群比所述样品中的所述靶蛋白群更纯，

其中所述库为组合肽库，并且所述结合部分为多肽。

2.权利要求1的方法，其中所述样品包含至少98％的所述靶蛋白群 和至多2％的污染蛋白。

3.权利要求1的方法，其中所述样品包括发酵液。

4.权利要求1的方法，其中所述靶蛋白群由单一蛋白种类组成。

5.权利要求1的方法，其中所述靶蛋白群包括重组蛋白。

6.权利要求5的方法，其中所述重组蛋白选自酶、激素、生长因子、 受体、疫苗、免疫球蛋白和任何前述蛋白的片段。

7.权利要求5的方法，其中所述重组蛋白选自血管内皮生长因子 (VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、表 皮生长因子(EGF)、转化生长因子(TGF)、胰岛素样生长因子(IGF)、促红 细胞生成素(EPO)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨衍生的神经营养因子 (BDNF)、集落刺激因子(CSF)、神经生长因子(NGF)、人生长激素(hGH)、 肿瘤坏死因子(TNF)、胰岛素、组织型纤维蛋白溶酶原激活剂(t-PA)、干 扰素、白介素(IL)和赫赛汀。

8.权利要求1的方法，其中所述靶蛋白群包括天然产生的蛋白。

9.权利要求1的方法，其中所述库包括至少1,000、至少10,000、 至少100,000、至少1,000,000、至少10,000,000或至少100,000,000种不 同的结合部分。

10.权利要求1的方法，其中所述组合肽库为六肽组合库。

11.权利要求1的方法，其中所述结合部分被结合至一个或多个固 体支持物。

12.权利要求11的方法，其中所述一个或多个固体支持物为小珠或 颗粒的集合。

13.权利要求11的方法，其中所述一个或多个固体支持物选自小 珠、纤维、滤器、膜和块状物。

14.权利要求11的方法，其中每个结合部分被连接至不同的固体支 持物。

15.权利要求11的方法，其中多个不同的结合部分被连接至单个固 体支持物。

16.权利要求1的方法，在步骤(a)之前还包括培养产生所述靶蛋白 群的细胞的步骤。

17.权利要求16的方法，其中所述细胞为真核细胞。

18.权利要求16的方法，其中所述细胞为原核细胞。

19.权利要求16的方法，其中所述样品为细胞上清液。

20.权利要求16的方法，其中所述样品为细胞提取物。

21.权利要求1的方法，在步骤(a)之前还包括以下步骤：

(i)使包含少于95％所述靶蛋白群和多于5％所述污染蛋白的在先样 品经历至少一个纯化步骤；以及

(ii)收集包含至少95％所述靶蛋白群和至多5％所述污染蛋白的样 品。