[发明专利]含营养浓缩物的柔性培养基袋

说明书

本发明涉及一种培养基袋，其包括一个主隔室和一个容置部(locus ofcontainment)，所述容置部包含在使用时方释放的营养浓缩物。

背景技术

微生物可以难以测量的低浓度存在于食品和环境中，但仍然造成重大的健康威胁。微生物学家在液态培养基中温育样品以检测病原微生物并进行病原微生物试验，所述病原微生物如包括在沙门氏菌属、李斯特氏菌属、葡萄球菌属、梭状芽孢杆菌属、弯曲杆菌属和埃希氏菌属的微生物。进行相似种类的测试以检测正常预计是无菌的样品中微生物的存在，所述样品如血液、脊髓液、医疗器械和各种各样的工业材料。

为了将微生物浓度提高到可测量水平，将用于分析的样品和使生物体群生长的营养培养基混合。该生长可在两个阶段进行：(1)营养物和样品的均质化，使它们密切混合，和(2)当样品和营养物暴露于促进目标生物体生长的温度时的更长的时期。在该第二阶段，可以向营养培养基中引入另外的添加剂，以创建对非目标生物体的生长不利的环境。这两个阶段在食品工业中称为“样品富集”。

美国专利6,312,930公开了一种检测复杂的样品混合物(例如食品样品)中的特定目标细菌的方法，这种方法是通过培养样品然后分离和检测目标细菌DNA而进行。目标DNA通过PCR扩增方法进行扩增，检测是由凝胶电泳或荧光方法完成的。

过去，样品富集是在诸如瓶子等的刚性封闭容器中进行的，但是如今优选的方法是在柔性塑料袋中进行富集，这种袋经常称为“均质袋”或“Stomacher^袋”。这些袋较之固体壁容器的优点在于机器可以机械化地操作该袋及其内容物，由此进行样品的均质化。典型的均质机有往复桨，将样品粉碎并将其与培养基混合。

实际上，测试实验室的微生物家或技术人员制备大量的具有不同组成的富集培养基(例如无菌液体培养液和缓冲稀释液)用于不同的目标微生物。培养基制备和灭菌是本领域的技术人员公知的。可以制备大批培养基和添加剂，并把较小部分移入均质袋进行个体分析。在各测试实验室中制备培养基是昂贵、耗力而且易出错的，尤其是在测量和转移操作中。食品和环境测试工业认为这种制备培养基、灭菌、储存和进样至均质袋中的过程很繁重。

因此，生产了预装填并预灭菌的刚性容器。这样，实验室就仅仅需要在容器到达后将测试样品进样至容器中。例如，参见美国专利6,379,949。

然而，由于溶液的重量和体积，即便是在柔性袋里输送液体培养液也不理想。在食品和环境测试工业中所需的各种分析要求稀释、体积、营养谱和/或其它因素不同的培养基。许多种培养基可能会导致生产和分配时过度复杂的预装填袋的库存。因此，提供具有标准营养浓缩物的均质袋比较理想，这些营养浓缩物可以在测试实验室中使用时加入净化水。或者，提供预装填的袋也比较理想，其中营养浓缩物和水直到使用袋时都装在分开的隔室里。另外，提供营养物直到使用时装在无菌包装中而不是“肉汤”中的袋使得在其计划使用前偶然进入袋的微生物的生长的可能性最小。而且，在有些情况下，不需要将各种营养成分一起存储在溶液中，而要求在使用时将它们混合。对于那些营养培养基的成分长时间不相容的情况，需要各含有最终营养培养基的成分的多个隔室。

具有脆性密封垫的柔性袋已经在例如美国专利4,602,910、美国专利申请2004/118710和PCT专利申请WO91/07503中公开。

发明内容

本发明涉及一种容器，例如培养基袋，其包含：(a)第一片聚合物膜；(b)第二片聚合物膜；(c)袋中的至少一个容置部；以及任选地(d)一个或多个附加的容置部，其中第二片叠加在第一片上；第一片和第二片聚合物膜可以直接彼此密封，或通过第三居间聚合物膜间接地进行密封，由此限定一个闭合袋形式的围绕主隔室的密封周界；所述的至少一个容置部可以包含一种营养浓缩物并且在使用时释放所述营养浓缩物以构成营养培养基；并且每一个附加容置部可以包含一种可以在营养浓缩物释放之后的步骤进行释放的添加剂。

本发明还涉及一种可以用于使用如上披露的容器确定怀疑存在于样品中的特定目标细菌的存在的方法。所述方法包括将样品插入容器中；从所述容器的容置部释放营养浓缩物并构成培养基；在培养基中温育样品以形成富集的复杂样品混合物(conplex sample mixture)；以及检测所述复杂样品混合物中目标细菌的存在。

具体实施方式