[发明专利]司替铵研究用测定法

说明书

相关申请资料

本申请要求2005年4月8日申请的美国临时专利申请顺序号 60/669,615、2005年11月8日申请的美国临时专利申请顺序号 60/734,518和2006年2月13日申请的美国临时专利申请顺序号 60/773,366的权益，所述临时专利申请的内容都通过引用全部结合到 本文中。

发明领域

本发明涉及用于测定的组合物、方法和试剂盒。更具体地讲， 本发明涉及司替铵(stilbazium)化合物及其类似物作为荧光剂、染色剂 或标记用于测定中的用途。

发明背景

用于检测同源核酸序列最常用的分子生物学技术之一是核酸杂 交，即DNA/DNA、RNA/RNA或RNA/DNA杂交。在这项技术中， 将用作探针的核酸(DNA或RNA)进行标记，然后使经过标记的核酸 与待检测核酸(DNA或RNA)杂交。当用作探针的核酸与待检测核酸 同源时，每条单链核酸与其互补序列杂交，以便形成双链序列，然 后通过标记探针检测双链序列。

在许多医学分支学科中，独立地鉴定、标记、分离、修饰或者 测定血液中或其它生物体液中的分析物、微生物、氨基酸或核酸序 列(例如多种病原体或多个基因或多个基因变异体)的需要日益明显。 大多数多种分析物测定法(例如检测多个核酸序列的测定法)，包括多 个步骤，灵敏度差，动态范围有限(通常大约相差2-100倍)和/或常常 要使用很复杂的仪器。

在阐明人类基因组时，存在着进行实验的各种机会以确定特异 序列的存在、区别纯合子和杂合子的等位基因、确定突变的存在、 评价细胞表达图式等。在多数情况下，期望在一个反应内确定同一 样品的多个不同特征。许多测定中，确定特异序列的存在，不论是 基因组序列、合成序列还是cDNA序列都是有益的。这些序列尤其 与基因、调节序列、重复序列、多聚体区、表达图式等有关。确定 一种或多种病原体的存在也同样有益。鉴定和定量测定可能分布于 DNA里摩的大量碱基或序列的需要，向我们提出了严峻的挑战。理 想的是，所用方法要精确，在限制所需试剂数量方面应适度经济和/ 或提供高度多重测定，允许鉴别和定量测定多个基因、和/或单核苷 酸多态性(SNP)测定、和/或RNA或蛋白质水平上的基因表达。

在早期药物开发测定中，放射性一直以来都是重要的读出信息。 然而，对更多信息、更高通量和小型化的需要引起了向荧光检测方 面的转变。基于荧光的试剂能够提供更有效的多参数测定，该测定 的通量和信息量较高，而需要的试剂和试验化合物的体积较小。与 基于放射性的方法相比，荧光方法既安全又便宜。