[发明专利]生产脂肪酶的方法

权利要求书

1.蛋白质，其特征在于具有至少一种如下性质：

a)具有包含共有序列AICHGP(SEQ ID NO：7)的氨基酸序列；

b)没有螺旋-转角-螺旋(HTH)DNA结合结构域；

c)在变性条件下由SDS-PAGE确定的分子量约为20-22kDa。

2.权利要求1所要求的蛋白质，其具有的pI值在5.4-5.5范围内。

3.上述权利要求的任一项所要求的蛋白质，其从伯克霍尔德氏菌属的细菌获得。

4.权利要求3所要求的蛋白质，其从荚壳伯克霍尔德氏菌获得。

5.上述权利要求的任一项所要求的蛋白质，其在生产细胞外脂肪酶的细菌宿主中表达之后，增加在标准条件下测定的细胞外脂肪分解活性。

6.权利要求5所要求的蛋白质，其中宿主是荚壳伯克霍尔德氏菌。

7.权利要求5或6所要求的蛋白质，其中细胞外脂肪分解活性与基础值相比增加至少约5％。

8.上述权利要求的任一项所要求的蛋白质，其包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列；或由其衍生的具有至少80％序列同源性的氨基酸序列。

9.上述权利要求的任一项所要求的蛋白质，其编码核酸包含SEQID NO：1或由其衍生的具有至少80％序列同源性的序列。

10.权利要求9定义的核酸序列。

11.表达构建体，其包含在至少一种调控核酸序列的遗传控制下的权利要求10所要求的核酸序列，该核酸序列编码具有蛋白酶活性的蛋白质。

12.重组微生物，其具有至少一种权利要求11所要求的表达构建体的遗传修饰。

13.权利要求1-9的任一项所要求的具有蛋白酶活性的蛋白质的生产方法，其中在表达该蛋白质的条件下培养重组微生物，并且分离形成的蛋白质。

14.脂肪酶(E.C.3.1.1.3)的生产方法，其中使能够产生脂肪酶的宿主表达权利要求1-9的任一项所要求的具有蛋白酶活性的功能性蛋白质，和使其同时或在不同时间表达脂肪酶，并且分离形成的脂肪酶。

15.权利要求14所要求的方法，其中该宿主是伯克霍尔德氏菌属的细菌。

16.权利要求14和15的任一项所要求的方法，其中该脂肪酶包含SEQ ID NO：6的氨基酸序列或由其衍生的具有至少80％序列同源性的氨基酸序列。

17.权利要求14-16的任一项所要求的方法，其中该脂肪酶由包含SEQ ID NO：5序列的核酸序列或由其衍生的具有至少80％序列同源性的核酸序列编码。