[发明专利]HIV疫苗

说明书

1.相关的申请

本申请要求2005年4月15日提交的美国申请系列号No.11/107,364的优先权；其是2001年4月2日提交的待决美国申请系列号NO.09/762,294的部分继续申请；其要求了1999年8月12日提交的国际申请NO.PCT/CA99/00746的提交日的权益；其要求了1998年8月12日提交的美国临时申请NO.60/096,235的提交日的权益；通过引用将所有这些的内容特别地合并在此。

2.发明领域

本发明涉及用于AIDS的预防和/或治疗的新的疫苗以及生产它的方法。更特别地，本发明涉及大量地生产AIDS病毒，用于非细胞溶解性和无毒力的HIV/AIDS疫苗的配制。

3.发明背景

尽管在抗病毒治疗中有新近的发展，对于AIDS或HIV感染没有不变的治愈方法。药物治疗对于提供有效的治疗而言是有前途的研究领域，然而由于副作用、顺应性和花费，进展不快。组合这些难处的事实是，这种药物的可用性在发展中国家受到限制，在那里估计将出现绝大多数的新HIV感染。

由于针对传染性疾病的疫苗已经获得的成功，最显著的是针对小牛痘和骨髓灰质炎，对于针对AIDS的有效疫苗的搜索在继续。已经尝试了多种方法。实际上，大多数HIV-1疫苗开发专注于亚单位疫苗。亚单位疫苗方法的困难是产生最佳的免疫性的能力。当前，不完全知道的是，HIV抗原和免疫系统的那个部分是自然感染的保护所必需的。

开发疫苗的优选的途径一般是使用完整的、钝化的或减毒的病毒，例如钝化的骨髓灰质炎病毒疫苗，或减毒的活病毒疫苗，例如口服骨髓灰质炎疫苗。不幸地，“Cutter事件”显示了这种方法是有问题的，其中骨髓灰质炎疫苗的不充分钝化引起了疫苗介导的临床骨髓灰质炎传播。

早期的疫苗试验已经考察了基于重组亚单位蛋白的免疫原，例如HIV-1包膜糖蛋白120(gp120)。这种方法的大多数结果是失望的，然而采用活的重组病毒和亚单位蛋白的免疫方式在某些个体中引发了包膜特异性CD8+CTL和针对HIV-包膜的中和抗体(Cooney，E.L.et al.Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90：1882-86(1993)；McElrath，M.J.et al.J.Infect.Dis.169：41-47(1994)；Graham，B.S.et al.J.Infect.Dis.166：244-52(1992)；和Graham，B.S.et al.J.Infect.Dis.167：533-37(1993))。

有趣地，被称为NSS(天然信号序列)的HIV-1gp120的信号序列，被发现与gp120的分泌程度相关。已经显示了，用蜜蜂mellitin或鼠白细胞介素-3(IL-3)的信号序列替换NSS引起了gp120的高水平产生和有效分泌(Li，Y.et al.Virology 204：266-278(1994)；和Li，Y.et al.Proc.Natl.Acad.Sci.93：9606-9611(1996))。然而，未知的是HIV-1gp120的信号序列是否在病毒的致病性中起到作用。

对于HIV疫苗，已经显示了删除HIV nef基因使病毒减毒。Desrosiers和他的同事证明了使用删除nef的SIV对恒河猴的免疫保护了野生型SIV攻击(Daniels，M.D.et al.Science 258：1938(1992)；Desrosiers，R.C.et al.Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86：6353(1989))，其他人证明了nef基因对于SIV和HIV复制是可有可无的(Daniels，M.D.et al.Science 258：1938(1992)；Gibbs，J.S.，et al.AIDS Res.and HumanRetroviruses 10：343(1994)；Igarashi，T.et al.J.Gen.Virol.78：985(1997)；Kestler III，H.W.et al.Cell 65：651(1991))。此外，已经发现删除nef基因在通常易感的宿主中使病毒非致病化(Daniels，M.D.et al.Science 258：1938(1992))。然而，已经发现这种删除提供了一种可以大量产生的病毒的形式。

因此，需要一种无毒力的并且可以大量生产的疫苗。

4.发明概述