[发明专利]细胞滋养层干细胞

权利要求书

1.分离的细胞滋养层干细胞，其中所述干细胞表达HLA-G和HLA I类抗原。

2.根据权利要求1所述的干细胞，其中所述干细胞是单个核的。

3.根据权利要求1或2所述的干细胞，其中所述干细胞表达至少一种选自细胞角蛋白7、阶段特异性胚胎抗原1、人胎盘催乳素、尾型同源框、波形蛋白和Cd9的干细胞标志物。

4.根据权利要求1-3中任一权利要求所述的干细胞，其中所述干细胞分离自灵长类。

5.根据权利要求4所述的干细胞，其中所述灵长类是人。

6.根据权利要求1-5中任一权利要求所述的干细胞，其中所述干细胞是经遗传修饰的。

7.包含权利要求1-6中任一权利要求所述的干细胞的用于组织工程的组合物。

8.包含权利要求1-6中任一权利要求所述的细胞滋养层干细胞的培养物，其中所述培养物装在细胞培养容器中。

9.包含权利要求1-6中任一权利要求所述的细胞滋养层干细胞和基于胶原的细胞支持基质的球状体。

10.根据权利要求9所述的球状体，其中所述组织分离自灵长类。

11.根据权利要求10所述的球状体，其中所述灵长类是人。

13.根据权利要求9-11中任一权利要求所述的球状体，其中所述球状体中的所述细胞滋养层干细胞表达至少一种金属蛋白酶。

14.根据权利要求13所述的球状体，其中所述金属蛋白酶是金属蛋白酶2。

15.衍生人细胞滋养层干细胞的方法，包括选择性富集表达HLA-G和HLA I类抗原的细胞滋养层干细胞。

16.从胚胎干细胞衍生人细胞滋养层干细胞方法，包括步骤：

i)在细胞培养容器中形成包含细胞滋养层细胞的胚胎样体；

ii)鉴别那些产生高于约500m I.U./ml绒毛膜促性腺激素的胚胎样体培养物；

iii)在来自成纤维细胞饲养细胞的条件培养基中培养(ii)中鉴别的胚胎样体；

iv)合并那些产生高于约500m I.U./ml绒毛膜促性腺激素的胚胎样体并分散所述胚胎样体；以及

v)重复(iv)直至基本上所有的胚胎样体产生高水平的绒毛膜促性腺激素。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述条件培养基包含成纤维细胞生长因子4和肝素。

18.通过培养权利要求15-17中任一权利要求所述的细胞滋养层干细胞而产生的用过的培养基。

19.产生血管内细胞滋养层细胞的方法，包括步骤：

i)提供权利要求1-6中任一权利要求所述的细胞滋养层干细胞的制备物；

ii)从所述制备物中筛选表达HLA-G和血小板内皮细胞粘附分子1的细胞群。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述的选出的细胞还表达血管性血友病因子。

21.根据权利要求19或20所述的方法，其中在高氧张力，优选至少5％CO₂下培养所述制备物。

22.通过权利要求19-21中任一权利要求所述的方法获得的或可获得的血管内细胞滋养层细胞。

23.用于形成包含细胞滋养层干细胞的球状体的体外方法，包括：

i)提供细胞培养容器，该容器含有：

a)权利要求1-6中任一权利要求所述的细胞滋养层干细胞；

b)细胞培养基；以及

ii)提供促进所述球状体中所述细胞滋养层干细胞的生长和分化的条件。

24.通过培养权利要求23所述的包含细胞滋养层干细胞的球状体而产生的用过的培养基。