[发明专利]枯草蛋白酶变体

说明书

技术领域

本发明涉及新的枯草蛋白酶(subtilase)变体，其相对于亲本枯草蛋白酶在一种或多种性质上显示出改变，所述性质包括：洗涤性能、热稳定性、贮藏稳定性和催化活性。本发明的变体适用于例如清洁或洗涤剂组合物中，例如衣物洗涤剂组合物和洗碗组合物，包括自动洗碗组合物。本发明还涉及编码所述变体的分离的DNA序列、表达载体、宿主细胞和用于产生和使用本发明的变体的方法。此外，本发明涉及包含本发明的变体的清洁和洗涤剂组合物。

发明背景

在洗涤剂工业中，将酶应用在洗涤配方中已超过30年。用在这些配方中的酶包含蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶，以及其它的酶，或它们的混合物。商业上最重要的酶是蛋白酶。

越来越多的商用蛋白酶是蛋白工程的变体或天然存在的野生型蛋白酶，例如和(Novozymes A/S)、Maxatase^TM、Maxacal^TM、Maxapem^TM、Properase^TM、Purafect^TM、PurafectOxP^TM、FN2^TM、FN3^TM、FN4^TM和Purafect Prime^TM(Genencor International，Inc.)、BLAP X和BLAP S(Henkel)。此外，许多蛋白酶变体在本领域得到描述。现有技术中蛋白酶变体的完整列表在WO 99/27082中列出。

然而，尽管已经描述了大量有用的蛋白酶变体，对于许多工业用途例如洗衣或硬表面清洁仍然存在对新的改进的蛋白酶或蛋白酶变体的需求。因此，本发明的目的是提供改进的枯草蛋白酶变体用于这些用途。

发明概述

因此，在第一方面本发明涉及枯草蛋白酶变体，其包含一个或多个表1中所列的修饰。

表1.枯草蛋白酶变体中的修饰

  T143K，Y167A，R170S，A194P  Y167A，R170S，A194P，K251R  Y167A，R170S，A194P，S265K  Y167A，R170S，A194P，V244R  S141E，Y167A，R170S，A194P  Y167A，R170S，M175I  Y167A，R170S，A172T  Y167A，R170S，A174V，M175F  Y167A，R170S，A172V，A174V  Y167A，R170S，A172E  Y167A，R170S，M175L  Y167A，R170S，A174T  Y167A，R170S，A174T，M175L  G53C，G61E  A98S，S99D，G100S  S9R，T22A，V68A，S99A，*99aD  S9R，P14H，R19L，N62D  G61P，*99aS  N43S，N62D  *96aG，P131S，V203A，A228T  N62D，A232C，Q236L，Q245N  *96aA，A98T，R247K  S99D，S101R，S103A，V104I，G160S，A194P，L217D  *61aD  N62D，S106A  V68A，S106M，N184D  S9R，A15T，*97aV，H120N  A15M，A16P，*99aD  *99aE，G160S，S163T，G195S，G211S，K237R，G258A，T260L  G23S，*99aD，A194P，S242T，Q245R