[发明专利]通过干扰CD99L2阻断白细胞迁出和炎症

说明书

导致本发明的研究部分得到国立卫生研究院的资助NO. HL64774的支持。因此，美国政府可能在本发明中具有一定的权利。

技术领域

本发明涉及抗炎症方法，特别是调节白细胞的经内皮迁移，和阻 断白细胞经内皮迁移的组合物。

背景技术

本说明书中用数字引用的参考文献列于实施例后面的“参考文 献”一节中。

先前的研究(1-12)已经证实了血小板/内皮细胞粘附分子-1 (PECAM)在嗜中性粒细胞(PMN)、单核细胞(Mo)和自然杀伤 细胞(NK)的经内皮迁移(TEM)中的关键作用。但是，甚至在最 理想的环境下，抗-PECAM试剂仅仅阻断白细胞流入的80-90％。虽 然这与通过靶向单个分子所获得的炎症阻断一样好或更好，但是剩余 的10-20％的未阻断的白细胞可能代表了在慢性病症下的临床上重要 的群体。而且，至少有一些PECAM不起作用的炎性模型。

炎症中白细胞的迁移

白细胞向炎症部位的迁移涉及由几个粘附分子家族介导的几个 步骤。我们的研究集中在经内皮迁移(TEM)的步骤上，因为它是白 细胞不可逆转地进入发炎组织的步骤。我们先前已经描述了在所有 Mo和PMN表面上表达并且在内皮细胞边界上浓缩的PECAM在TEM 中的关键作用。在最佳控制的条件下，抗-PECAM试剂在体外和许多 体内模型中阻断80-90％的TEM。但是，总是有至少10-20％的白细胞 逃避了这种阻断(1，2，4，6，8)。而且，至少描述了一种体内模型， 其中抗-PECAM抗体没有效果(9)。靶向清除PECAM产生在急性炎 性应答中没有显著缺陷的小鼠(26)。因此，存在独立于PECAM的 TEM的机制。了解这些机制将导致更好地理解炎症。以这些途径为 靶标可能是针对PECAM的抗炎症治疗的有用的辅助手段。

白细胞迁出(emigration)中分子上可分割的步骤

炎性反应是一把双刃剑。白细胞移动到炎症病灶对于感染的快速 消退和由多种损伤引起的组织损伤的恢复是关键的。另一方面，大多 数人类病理学是由于误导或拖延的炎症引起的，造成宿主组织被损 伤。常见的例子包括炎性关节病、肺纤维化和动脉粥样硬化症，其通 常被看作一种动脉壁的慢性炎性疾病(13)。因此，已经将大量的注 意力集中于在分子水平上了解炎症，以希望可以更好地调节炎症。

白细胞迁出的过程在下列工作模型中分为一系列连续的粘附事 件。我们可将白细胞迁出分为这些步骤，因为我们具有可阻断每个步 骤的试剂。

滚动。在第一个步骤中，一些进入毛细管后小静脉的炎症区域的 白细胞在一个被适当地称为“滚动”的过程中离开循环流并松散、暂时 且可逆地与内皮细胞表面粘附。粘附分子的选择家族和它们的唾液酸 化的-lexis^x-修饰的配体表现为主要负责这种初始相互作用(在(14， 15)中综述)。滚动的白细胞直接与内皮接触，将它们暴露于多种能 够促进接下来的步骤-活化白细胞特异性整合蛋白-的信号。白细胞 与E-选择素的结合本身可能就是一种充分的信号(16)。可选地或另 外，被选择素限制的白细胞现在能够被血小板活化因子(17)或其他 脂质调节物(18)、与内皮表面糖胺聚糖结合的趋化因子(19)、可溶 性化学引诱物(20)或交联白细胞CD31的配体(3，21，22)活化。

粘附。在它们的整合素被活化为高亲和力结合状态后，白细胞停 止滚动并紧密地与内皮表面粘附。对于表达β1和β2家族的整合素的 单核细胞和淋巴细胞，每种整合素的参与可能足以促进粘附，以利于 接下来的变移(transmigration)(23)。鉴定的β1和β2整合素介导的 粘附的反受体包括ICAM-1、ICAM-2和VCAM-1，它们是免疫球蛋 白基因超家族的成员。与内皮细胞内腔表面紧密结合的白细胞快速蠕 动到细胞间连接处，该过程需要粘附和解粘附的连续循环，因为白细 胞在它们的前端粘附并且在后端释放。