[发明专利]载玻片沉积小室

说明书

本申请要求2005年7月8日递交的美国专利申请序列号11/177,036的权益。因此该申请的公开内容所教给的适当的附加或可选的细节、特征、和/或技术背景通过引用被全部并入，并从其要求优先权。

技术领域

本发明涉及将生物材料沉积到显微镜载玻片上。更具体地，本发明涉及使用沉积小室(deposition chamber)来将各种材料沉积到显微镜载玻片上的设备和方法。小室可以是一次性的，或非一次性的即可再用的，如在本发明的实施例中所公开的。

背景技术

在实验室进行的诊断过程一般首先从患者身上收集生物材料样本。样本可包括但不限于血液、唾液、尿、上皮涂片、精液等。存在多种从悬浮液中以固定的细胞或细胞核的形式将这些样本沉积在显微镜载玻片上的方法，以便免疫细胞化学染色、免疫荧光染色或FISH(荧光原位杂交)染色和随后的显微分析。沉积方法根据用途而改变。

例如，涂抹方法可用于在载玻片上沉积血液样品以用于显微分析。涂抹可能需要将一滴几微升抗凝剂处理的血液放置在载玻片的一端上，且使用另一个干净的载玻片以一个动作涂抹血液。被正确执行后，涂抹形成了覆盖大部分载玻片表面的相对均匀的单层血细胞。然后，使载玻片在环境条件下变干燥。干燥过程主要是将细胞附着到玻璃载玻片上。制备血液涂片是与使用者密切相关的一个过程。涂抹可用于制备全血载玻片。使该过程自动化的尝试是极其不成功的。

另一种方法涉及“滴落(dropping)”方法。滴落是由各种来源的细胞制备用于FISH分析的固定核的普通方法，这些来源包括羊水、血液和骨髓吸出物。这些细胞可以是来自样品的原发细胞或培养细胞。样品可悬浮在有机溶剂中，例如卡诺(Carnoy)固定液(3:1，甲醇:乙酸)。

固定核悬浮液可从预定高度(通常为15-20cm)以单滴的形式滴在玻璃载玻片上。由于液滴在载玻片上撞击的结果，悬浮液可按同心方式扩展以覆盖载玻片的宽度，取决于悬浮液被滴落的高度。然后，允许溶液挥发，如果玻璃是干净的且被适当处理，这导致细胞核附着到载玻片上。然而，沉积的模式和位置是不可预测的，且只可部分地控制所沉积的样品的数量。载玻片上细胞的分布和最后得到的密度通常是不可预测的。然而，如果不要求细胞核的量化和系统化的扫描，那么这种方法在大多数情况下是适当的。

为了获得对沉积模式的更好控制且使样品沉积过程自动化，开发了使用离心力将细胞或细胞核放置在载玻片上的方法。通过使用可调节的力在载玻片上放置细胞的离心法还允许附着一些不能附着到载玻片表面的样品类型。设计成在专用离心机中的显微镜载玻片上沉积材料的被称为细胞离心机(Cytospin)的离心装置由Shandon公司制造并显示在图1中。

细胞离心机10包括小室20，小室20接纳载玻片30且可安装到保持架/托架40上，如图1所示。小室的位置设置成使载玻片稍微倾斜且样品悬浮液借助于吸液管60穿过开口或端口50被装入(图2a)。悬浮液70包含悬浮细胞75。悬浮细胞以可通过著名的斯托克(Stoke)方程的变形预测的沉淀速度立即开始沉淀。因此，如图2a所示，包括细胞75的初始颗粒在细胞离心机小室的底部形成，初始颗粒的尺寸与装入小室和开始离心动作之间的时间成比例。整个细胞离心机组件10(小室20-载玻片30-保持架40)紧接着置于离心机中(未显示)。当离心机加速且在离心力80的作用下时，液体70逐渐升高到如图2b所示竖直位置。在离心期间，悬浮液对着载玻片30被压缩且细胞被压到载玻片上，如图2c所示。然后，当离心机停止时，细胞75被留下来附着到载玻片30上，剩余的浮于上层的悬浮液70流回其在小室20内的原始位置，如图2d所示。