[发明专利]劳森菌疫苗及其使用方法

说明书

相关申请

本申请要求2005年7月15日提交的美国临时专利申请60/699,946的权益，该临时申请的教导和内容被引入本文以作参考。

技术领域

本发明广泛涉及用于对抗猪增殖性肠炎(称为回肠炎)的免疫的改良接种方法，该肠炎由专性细胞内细菌胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis)引起。具体的说，本发明提供分别藉由接种怀孕母猪、接种怀孕母猪且随后接种其出生后约三周内的幼仔猪、及接种出生25或26天内的幼仔猪来提供增强抗胞内劳森菌的保护力的方法。

现有技术

猪的增殖性肠炎(PPE)是天然发生的疾病，其可影响断乳至幼成年(youngadult)期的猪。已经证实病原体为胞内劳森菌-一种专性的胞内革兰氏阴性细菌，其无法藉由常规细菌学方法在常用的无细胞培养基中培养，且被认为其需要细胞而生长。S.McOrist等人于Infection and Immunity，第61卷，第19期，4286-4292(1993)及G.Lawson等人于J.of Clinical Microbiology，第31卷，第5期，1136-1142(1993)讨论使用IEC-18大鼠肠上皮单层细胞在常用的组织培养瓶中培养胞内劳森菌。美国专利第5,714,375及5,885,823号中描述在悬浮的宿主细胞中培养胞内劳森菌，其均以全文引用方式并入本文。

胞内劳森菌的致病及非致病减毒菌株为技术领域中所熟知。举例而言，WO 96/39629及WO 05/011731描述胞内劳森菌的非致病减毒菌株。自WO02/26250及WO 03/00665中可知更多的胞内劳森菌的减毒细菌株。此等参考文献各自的教导及内容以引用方式并入本文。

该疾病的特征是，首先有肉眼及显微可见的病理学，随后在受感染的细胞内证实有胞内细菌。该疾病的病理特征是，位于回肠(小肠的末端部分)、大肠或二者的隐窝(crypt)中的未成熟上皮细胞增殖。受染组织的切片的特征为，具有类似“园艺软管(garden hose)”的变红增厚粘膜及肠病灶。此增厚的肠道最终防碍正常的肠道功能、吸收能力及营养传递。该疾病的临床影响包括，慢性体重减轻、不壮实、腹泻及死亡。该疾病由于在受感染动物中因动物死亡造成损失、增加医药开销、增重不佳及降低受染动物的饲料换肉率(fodd conversion)而具有经济上的重要性。最常见的临床回肠炎案例发现于6-20周龄的猪。然而，近已证实(藉由PCR)，在新断乳的猪(3-4周龄)中出现胞内劳森菌，提示哺乳(nursery)期间接触了胞内劳森菌，且可能来源于劳森菌阳性母畜(Mauch及Bilkei(2004)Vet Rec 155：532；Marstelle等人(2003).Swine Health Prod 11：127-130；Stege等人(2004).Vet Micro 104：197-206)。此等观察结果强调在生产系统中较早施行疫苗接种等预防策略的重要性。

目前用于抗回肠炎的免疫中的疫苗接种策略包括，使三周龄以上的未感染劳森菌的猪口服疫苗，因为低于此年龄组的仔猪由于先前接触母猪或疫苗接种而可具有胞内劳森菌阳性母体抗体。在本发明方法之前认为，母体抗体或其它催乳因子的存在可能干扰该等仔猪中疫苗接种的功效，因为母体抗体在仔猪免疫系统能识别疫苗、并开始分泌其自身抗体之前就具有中和该疫苗的能力。因此，当具有母体免疫时，应避免幼年仔猪接种疫苗。

发明概述

本发明克服先前技术的缺点，提供增强猪抗回肠炎的保护力的新方法。具体的说，本发明提供一种对母猪及/或出生后数周内的幼仔猪施用免疫有效量的疫苗以使其具备对抗回肠炎的免疫的方法。此前发现，由接种过或接触过劳森菌的母猪传递到仔猪中的母体免疫力，给出生后至少6周的仔猪提供了一定程度的抗回肠炎的保护力。然而除非经过接种，否则仔猪很快变得易患该疾病。本发明的该等方法证实，在怀孕动物中重复使用高剂量疫苗，以及甚至在怀孕第二或第三阶段施用，对于提供母体免疫而言，具有惊人的安全性及有效性。

因此本发明大体涉及一种给怀孕动物(较佳为猪)进行对抗胞内劳森菌感染的疫苗接种的方法，其中用胞内劳森菌抗原给该等怀孕动物接种。根据另一方面，用高剂量及/或多次施用的胞内劳森菌抗原进行疫苗接种。根据另一方面，本发明涉及一种给怀孕动物(较佳为猪)进行对抗胞内劳森菌感染的疫苗接种的方法，其中给该等怀孕动物在怀孕第二或第三阶段中进行接种疫苗，较佳为用高剂量及/或多次施用的胞内劳森菌抗原给彼等怀孕动物接种。