[发明专利]杂交检测方法

权利要求书

1.一种杂交检测方法，其在使探针核酸链与靶核酸链之间进行杂交之后，进行升温处理工序，使进行该杂交的反应场的温度高于规定温度，

从而提高杂交检测时的S/N比。

2.根据权利要求1所述的杂交检测方法，其特征在于，在所述升温处理工序中，

在进行所述杂交后，将所述反应场的温度设定为高于错误杂交的结果所得到的错配双链核酸的解链温度(Tm)并且低于完全匹配双链核酸的Tm的温度，由此使该错配双链核酸选择性地解离。

3.根据权利要求2所述的杂交检测方法，其特征在于，在所述反应场的每个点固定有不同序列的所述探针核酸链，

所述升温处理工序基于所述探针核酸链与所述靶核酸链的Tm，在所述每个点独立地进行。

4.根据权利要求1所述的杂交检测方法，其特征在于，在所述升温处理工序中，

通过加大所述杂交的反应平衡常数与所述错误杂交的反应平衡常数之差，

使所述错误杂交的结果所得到的错配双链核酸更加选择性地解离。

5.根据权利要求1所述的杂交检测方法，其特征在于，使所述反应场的温度瞬间上升到所述规定温度。

6.根据权利要求5所述的杂交检测方法，其特征在于，通过高温溶液置换，使所述反应场的温度瞬间上升到所述规定温度。

7.根据权利要求1所述的杂交检测方法，其特征在于，使用与双链核酸吸附或结合的嵌入剂检测杂交。

8.根据权利要求1所述的杂交检测方法，其特征在于，通过进行所述升温处理而选择性地解离错配双链核酸，从而减少来自于该错配双链核酸的噪音荧光。

9.根据权利要求7所述的杂交检测方法，其特征在于，该方法至少包含：

核酸供给工序，其向保持或固定有探针核酸链的反应场供给靶核酸链；

第一升温处理工序，其将所述反应场的温度升高；

嵌入剂供给工序，其向所述反应场供给嵌入剂；

第二升温处理工序，其将所述反应场的温度再次升高；

杂交检测工序，其通过所述嵌入剂检测杂交。

10.根据权利要求9所述的杂交检测方法，其特征在于，所述第二升温处理工序中，进行以下(1)、(2)任意一种或两种：

(1)将吸附到存在于反应场中的单链核酸上的嵌入剂，从该单链解离；

(2)将存在于反应场中的单链核酸所形成的自身环化结构解开。

11.根据权利要求1所述的杂交检测方法，其特征在于，在进行杂交的阶段，对所述反应场施加电场。

12.根据权利要求1所述的杂交检测方法，其特征在于，在进行所述升温处理的工序中或在其前后的工序中，对所述反应场施加电场。

13.根据权利要求1所述的杂交检测方法，其特征在于，所述探针核酸链固定于所述反应场中，

在所述升温处理后，

溶液洗涤该反应场，以使通过与该探针核酸链杂交所得的完全匹配双链核酸留在反应场中。

14.根据权利要求13所述的杂交检测方法，其特征在于，在对升温处理后的反应场进行电场施加后，进行所述溶液洗涤。

15.根据权利要求14所述的杂交检测方法，其特征在于，重复数次由所述电场施加和溶液洗涤组成的工序。