[发明专利]用于MON89788大豆疾病控制的方法

说明书

发明背景

本申请要求享有2005年5月27日登记的美国临时专利申请No.60/685,548的优先权，并将该申请的全部公开内容在此引入作为参考。

1.发明领域

本发明涉及化学疾病控制领域。更具体地说是，本发明涉及一种通过向耐草甘膦大豆MON89788施加草甘膦或草甘膦与杀真菌剂的混合物来控制大豆病害的方法。

2.相关技术介绍

大豆，Glycine max(L.)Merril，其作为植物油和蛋白质的主要来源是世界范围生长的主要经济作物之一(Sinclair和Backman，1989)。对低胆固醇和高纤维饮食的需求的增长也提高了大豆作为健康食品的重要性。

在美国，大豆产量由于疾病的作用而逐年减少。高的每公顷产量对农民的利润幅度是至关重要的，尤其是在大豆价格低的时期。由大豆病害引起的财政损失对农村经济和对城市地区的相关工业经济来说是重要的。人们认为这些损失的影响终究会遍及全世界的大豆市场。在美国和安大略省，对由病害所导致的损失的估计值由于年与年的不同以及由于病害的不同而不同。从1999年到2002年，美国的大豆产量损失估计在8百万公吨到1亿公吨的范围内，安大略省的在90,000到166,000公吨的范围内(Wrather等人，2003)。

在东半球和西半球均已经报道发现了亚洲大豆锈病(本文称其为ASR)。在东半球，澳大利亚、中国、印度、日本、台湾和泰国均已经报道发现了ASR。在西半球，巴西、哥伦比亚、哥斯达黎加、波多黎各与其它地区一起也均观察到了ASR。ASR是一种破坏性的疾病，根据在台湾一些地区的报道，其能够导致产量损失高达70到80％。严重感染的植株的豆荚较少且豆粒较小，也就是说其质量差(Frederick等人，2002)。在美国首次观察到ASR是于1994年在夏威夷。大概由于热带风暴活动的结果，后来ASR在2004年秋被引入美国大陆。模式预测显示ASR已经广泛地分布在整个美国东南部，随后的田间和实验室观测证实了这一分布。

N-膦酰甲基甘氨酸，又名草甘膦，是一种众所周知的除草剂，其对许多植物种均有活性。草甘膦是(Monsanto Co.，St.Louis，MO)的活性成分，是一种安全的除草剂，其在环境中具有所期望的短的半衰期。当将其施加到植物表面时，草甘膦能够通过植物进行全身性地转移。草甘膦是植物毒性的，这是由于其对莽草酸途径的抑制作用，草甘膦为芳香族胺基酸的合成提供了前体。草甘膦抑制了存在于植物中的酶5-烯醇式丙酮莽草酰-3-磷酸合酶(EPSPS)。

草甘膦耐受性能够通过EPSPS变种的表达而获得，所述EPSPS变种对草甘膦具有较低的亲和力并因此能够在存在草甘膦时保持它们的催化活性(美国专利Nos.5,633,435；5,094,945；4,535,060和6,040,497)。将这样的基因用于生产对草甘膦具有耐受性的转基因作物，从而允许使用草甘膦来进行有效地杂草控制并最小地引起作物损伤。例如，草甘膦耐受性已经通过基因工程引入到了谷物(美国专利5,554,789)、小麦(美国专利6,689,880)、棉花(美国专利6,740,488)、大豆(WO9200377)和蓖麻(US 20040018518)中。已经显示，用草甘膦处理耐草甘膦禾谷类作物能够减少发病率或严重度(US 2005000654442和US2003000532758，在此引入以上两篇文献作为参考)。

本发明提供了一种用草甘膦处理新的耐草甘膦大豆事件(event)MON89788(也称作MON19788或GM A19788)以控制各种真菌病，尤其是亚洲大豆锈病的方法。

发明简介

本发明涉及一种用于控制名为MON89788的大豆转基因事件的疾病的方法，并且其后代在美国标准培养物保藏所(American TypeCulture Collection)(ATCC)中具有代表性种子的保藏，其登记号为PTA-6708。所述用于在大豆植株中预防疾病的方法包括(a)鉴定处于患上由植物病原体引起疾病的危险中的大豆植株，其中所述的被鉴定的大豆植株是包含转基因的事件MON89788，所述转基因对赋予植物草甘膦耐受性的多肽进行了编码；和(b)向大豆植株施加包含草甘膦的制剂或混合物，从而使得MON89788大豆植株中的疾病得以预防。在发明的另一方面，通过施加草甘膦控制了MON89788田间的杂草和疾病。