[发明专利]用于治疗非小细胞肺癌的星形孢菌素衍生物

说明书

介绍

在过去的几十年中对调节存活、遗传稳定性、代谢活性和增殖的细胞信号转导途径的分子理解极大地增加。因此，在临床前癌模型和肿瘤样本中进行仔细分析导致鉴定到在恶性转化和癌发展期间作为起作用的或甚至是起因因素的这些途径的特定失调(1)。针对这个背景，人们致力于研发调整的针对特定靶的将癌细胞与非恶性细胞区分开的疗法。在BCR-ABL-阳性白血病和胃肠基质肿瘤中激酶抑制剂伊马替尼(imatinib)这一小分子药物的成功的临床应用令人难忘地对此种观念提供了原理上的证实(2)。但是，对未经选择的患者群体，针对显然不太必需的信号转导途径的药学上的抑制剂仅显示极小的临床活性。而且，将细胞毒性药与非抗体抑制剂联用至今为止在肺癌或结肠直肠癌中还未产生改善的临床结果(3-6)。

基于这些观察，我们认为由药学上的激酶抑制剂诱导的癌细胞死亡确实通过不同于那些由标准的细胞毒性抗癌药引起的分子途径发挥作用。作为选择，这两种途径能在信号转导中的共同步骤处汇合，然后这能构成用于突破抗药性的策略性靶。

对患有进展性非小细胞肺癌(NSCLC)的患者进行细胞毒性治疗仅具有中等的临床活性。近年来，表皮生长因子受体信号传导的抑制剂显示在NSCLC患者亚组中有效，并且调节其它的信号传导途径具有明显的前景。需要当前不被现有的抗癌药靶向的靶向分子途径的癌治疗法。

发明概述

我们研究了在NSCLC细胞中蛋白激酶C(PKC)特异的抑制剂星形孢菌素和PKC412诱导的凋亡。令人感兴趣的是，我们发现抗细胞毒性抗癌药的细胞系也保护细胞免受PKC特异的抑制剂的作用。将PKC抑制剂与细胞毒性剂联用产生不同的结果，如增加或降低的细胞毒性。相反，通过条件性表达BAK靶向凋亡的线粒体途径可靠地使抗药的NSCLC对PKC特异的抑制剂敏感。总之，将治疗性靶向BCL-2蛋白质家族与PKC特异的抑制剂如PKC412联合是在治疗癌中提高激酶抑制剂功效的有前景的策略。

附图简述

图1A-1B为显示用细胞毒性抗癌药和PKC特异的抑制剂体外处理NSCLC细胞系的相似抗性模式的图。

图2A-2E为显示将细胞毒性抗癌药和PKC特异的抑制剂联合体外没有导致预期的协同细胞毒性的图。

图3A-3D为显示对PKC特异的抑制剂具抗性的NSCLC细胞系表现出线粒体细胞色素c的延迟释放、维持Δψm、以及不活化胱天蛋白酶的图和照片。

图4A-4D为显示条件性表达BAK使抗药的NSCLC细胞系对凋亡敏感的照片和图。

图5A-5D为显示靶向线粒体BAK使抗药的NSCLC细胞系对PKC412诱导的凋亡敏感的图。

详细描述

在过去的几十年中对调节存活、遗传稳定性、代谢活性和增殖的细胞信号转导途径的分子理解极大地增加。因此，在临床前癌模型和肿瘤样本中进行仔细分析导致鉴定到在恶性转化和癌发展期间作为起作用的或甚至是起因因素的这些途径的特定失调(1)。针对这个背景，人们致力于研发调整的针对特定靶的将癌细胞与非恶性细胞区分开的疗法。

BCL2癌基因(OMIM 151430)在多种条件下作为有效的凋亡抑制物发挥作用。Bcl-2拮抗杀伤因子-1(“BAK1”OMIM 600516)蛋白为Bcl-2同系物，发现其拮抗Bcl-2，促进细胞死亡并抵消由Bcl-2提供的免于凋亡的保护。过量表达BAK诱导去血清培养的成纤维细胞的快速和广泛的凋亡，提示BAK直接参与激活细胞死亡机制。BAK主要增强在合适刺激物刺激后的凋亡性细胞死亡。因此，BAK调节物用于调节凋亡信号转导途径。在BCR-ABL-阳性白血病和胃肠基质肿瘤中激酶抑制剂伊马替尼这一小分子药物的成功的临床应用令人难忘地对此种观念提供了原理上的证实(2)。

但是，对未经选择的患者群体，针对明显不太必需的信号转导途径的药学上的抑制剂仅显示极小的临床活性。而且，将细胞毒性药与非抗体抑制剂联用至今为止在肺癌或结肠直肠癌还未产生改善的临床结果(3-6)。基于这些观察，我们认为由药学上的激酶抑制剂诱导的癌细胞死亡确实通过不同于那些由标准的细胞毒性抗癌药引起的分子途径发挥作用。作为选择，这两种途径能在信号转导中的共同步骤处汇合，然后这能形成用于突破抗药性的策略性靶。