[发明专利]用于治疗或预防免疫缺陷病毒感染的核酸

说明书

技术领域

[0001]

本发明涉及一种用于治疗或预防免疫缺陷病毒感染所引起的疾病的核酸构建体。

背景技术

[0002]

人免疫缺陷病毒(HIV)感染从而破坏表达CD4分子的细胞(例如，T细胞)。因此，在感染HIV的人体中，CD4-阳性的T细胞(辅助T细胞)数量会下降且细胞免疫力会降低。感染最终导致严重的免疫缺陷状况和机会感染，例如卡氏肺炎的发作。这种情况被称为获得性免疫缺陷综合症(AIDS)。

[0003]

关于治疗HIV感染的方法，阻断HIV生命周期的抗病毒剂(反转录酶抑制剂，蛋白酶抑制剂等)和疫苗已经研制出来，几种抗病毒剂已经被实际应用。然而，由于HIV的突变频率很高，在感染病人体内形成会对上述药剂无效的突变体。因此，还不能说已经具有一种完善、特殊的治疗法。另一方面，研制基因治疗药物，如用核酸(RNA诱杀剂，核糖核酸酶等)或蛋白(反式显性突变体蛋白，细胞内抗体等)作为有效成分来抑制HIV多重复制的尝试还在进行。

[0004]

一种可特异性地导致HIV感染细胞死亡的方法已经建立(例如，专利文件1，非专利文件1，2和3)。在该方法中，编码一种可产生细胞毒性的产物基因被连接到HIV中LTR启动子的下游。迄今为止，此方法尚未应用于临床。使用核糖核酸酶作为产生细胞毒性物质的方法在专利文件2中有所描述(美国专利号5837510)，虽然核糖核酸酶是否会引起HIV-感染细胞死亡尚不能确定。众所周知，人胰核糖核酸酶(RNasel)是典型的核糖核酸酶，其在胞质中可被核糖核酸酶抑制剂所抑制(非专利文件4)。因此还不能说其适于上述目的。

[0005]

据报道，几种原核质粒具有分离后杀死(post-segregation killing，PSK)宿主的功能，他们在离开宿主后杀死宿主以维持宿主内的质粒。这种质粒具有毒素-抗毒素基因。抗毒素可与细胞内的毒素结合从而使该毒素失活。抗毒素易被蛋白酶降解。抗毒素被蛋白酶降解将导致毒素被激活，这一激活过程是很稳定的。这些毒素-抗毒素基因还存在于多数原核细胞的染色体中。他们对不同的应激作出反应，且在程序性细胞凋亡中起作用。虽然毒素的作用还不能完全被证实，已知MazF是一种mazE-mazF系统的毒素(非专利文件5)，PemK是一种pemI-pemK系统的毒素(非专利文件6)，两者均具有序列特异性核糖核酸酶活性。此外，已经提出了一种获得高纯度目标蛋白的方法(专利文件3)。在这种方法中，mRNA被毒素降解，只有编码目标蛋白的mRNA被翻译，其他被毒素降解的序列在此之前已被去除。

[0006]

专利文件1：美国专利号5554528

专利文件2：美国专利号5837510

专利文件3：WO 2004/113498

非专利文件1：Hum.Gene Therapy，2：53-61(1991)

非专利文件2：Proc.Natl.Acad.Sci.USA，91：365-369(1994)

非专利文件3：Hum.Gene Therapy，10：103-112(1999)

非专利文件4：Proc.Natl.Acad.Sci.USA，95：10407-10412(1998)

非专利文件5：Molecular Cell，12：913-920(2003)

非专利文件6：J.Biol.Chem.，279：20678-20684(2004)

发明内容

发明所要解决的问题

[0007]

本发明是基于上述现有技术进行的。本发明的主要目的是为了提供一种更有效治疗HIV感染的方法。

解决问题的手段

[0008]

本发明人发现，HIV感染导入了下述核酸构建体的细胞后，诱导了具有单链RNA特异性内源核酸酶活性的多肽表达，从而分解细胞内的mRNA，由此可以防止上述的细胞中HIV的复制并防止其感染他细胞，所述核酸构建体中，在可与人免疫缺陷病毒的反式激活蛋白作用诱导转录的转录调节序列的下游，连接了编码具有单链RNA特异性内源核酸酶活性的多肽的基因。本发明基于此原理而完成。

[0009]

本发明涉及：

[1]一种核酸，包含：

可与人免疫缺陷病毒的反式激活蛋白作用从而诱导转录的转录调节序列；和

编码具有单链RNA-特异性内切酶活性的多肽的基因，且该基因位于其表达可被所述序列调控的位置；