[发明专利]介导植物雄性生育力的核苷酸序列以及使用其的方法

权利要求书

1.一种方法，用于保持雄性不育植株的纯合隐性状态，所述方法包 括：

(a)提供第一植株，其包含Ms26基因的纯合隐性等位基因，并且 其是雄性不育的；

(b)向第二植株中引入下述构建体，所述第二植株包含Ms26基因 的纯合隐性等位基因，所述构建体为半合状态，所述构建体包含：

(i)第一核苷酸序列，其包含Ms26核苷酸序列，当在第一植株中 表达时其将恢复雄性生育力；

(ii)第二核苷酸序列，当其表达时，会抑制所述第二植株中可育 雄性配子的形成或功能，从而使得在含有Ms26的隐性等位基因的所述 第二植株中产生可育的雄性配子，并且所述雄性配子不含所述构建体； 以及

(c)用所述第二植株的雄性配子使所述第一植株受精，以产生保 持了所述第一植株纯合隐性状态的后代。

2.如权利要求1所述的方法，其中，所述第一核苷酸序列与第三核 苷酸序列可操作地相连，所述第三核苷酸序列指导偏好于雄性植物细胞 的表达。

3.如权利要求2所述的方法，其中，所述第三核苷酸序列仅在存在 诱导物质或诱导条件时才具有功能。

4.如权利要求2所述的方法，其中，所述第三核苷酸序列选自5126、 Ms26和Ms45的雄性组织调控序列构成的组。

5.如权利要求1所述的方法，其中，所述第二核苷酸序列与第四核 苷酸序列可操作地相连，所述第四核苷酸序列指导偏好于雄性配子的表 达。

6.如权利要求1所述的方法，其中，所述第二核苷酸序列选自DAM 甲基化酶基因、Zea mays α淀粉酶基因和细胞毒素编码基因的核苷酸序 列构成的组。

7.如权利要求6所述的方法，其中，所述第二核苷酸序列与第四核 苷酸序列可操作地相连，所述第四核苷酸序列指导向雄性配子的表达。

8.如权利要求5所述的方法，其中，所述第四核苷酸序列选自聚半 乳糖醛酸酶47基因、Zm13基因、果胶甲基酯酶基因、钙调蛋白结合蛋白 基因、肌动蛋白解聚因子基因、prolfilin基因和硫酸化五肽 phytosulphokine基因的调控区域构成的组。

9.如权利要求1所述的方法，其还包含第五核苷酸序列，该序列编 码下述产物，所述产物的表达能用于选择具有所述构建体的植物细胞。

10.如权利要求9所述的方法，其中，所述第五核苷酸序列选自红色 荧光基因、青色荧光蛋白基因、黄色荧光蛋白基因、荧光素酶基因、绿 色荧光蛋白基因、花青甙p1基因和草丁膦乙酰转移酶编码基因构成的 组。

11.如权利要求9所述的方法，其中，所述第五核苷酸序列与选自聚 半乳糖醛酸酶47基因、Zm13基因、果胶甲基酯酶基因、钙调蛋白结合蛋 白基因、肌动蛋白解聚因子基因、prolfilin基因和硫酸化五肽 phytosulphokine基因构成的组的调控区域可操作地相连。

12.如权利要求1所述的方法，其还包括通过鉴定具有所述构建体的 植株来选择所述第二植株。