[发明专利]用于诊断膀胱癌的多肽标记

说明书

技术领域

本发明涉及对象试样中一种或更多种肽标记的是否存在或强度(amplitude)用于(差异性)诊断膀胱癌的用途，并涉及用于诊断膀胱癌的方法，其中一种或更多种所述肽标记的是否存在或强度是患有膀胱癌以及膀胱癌的肿瘤分期的指征。

背景技术

膀胱癌是膀胱粘膜上的恶性肿瘤。膀胱癌是最常见的恶性疾病之一。在泌尿科学领域，它是前列腺癌之后第二常见的癌症疾病。在德语世界中，每年100000个人中就有约22个患有这种疾病。男性中膀胱癌的发病频率为女性的约两到三倍。在德意志联邦共和国每年估计有13000名男性和5000名女性患该疾病。膀胱癌是年龄较高时出现的疾病。从40岁开始，发病风险随年龄增加而增加。

膀胱癌的诊断：

对于膀胱癌不存在真正的早期检测。如果出现血尿或者排尿问题，则强烈建议立即看医生。这样可以尽可能早地检测膀胱癌。如果怀疑膀胱中有肿瘤，例如如果观察到血尿或者存在持续的膀胱刺激征状，则应该进行膀胱镜检查。如果检查者在膀胱壁发现肿瘤，他可以估计肿瘤穿透哪个壁层并且取样进行显微镜检查。根据肿瘤生长区分浅表性癌症和浸润性(侵入组织的)癌症。后者已经生长到膀胱的肌肉系统中，并且可能扩散到邻近器官(例如男性的前列腺，或女性的子宫)。根据TNM系统进行粘膜肿瘤的组织病理分类。

浅表性癌症：

pTa＝粘膜的非侵袭性乳头癌(膀胱上皮(Urothel))

pTcis＝原位癌

pT1＝侵入至粘膜下(上皮下的结缔组织)，亚分类pT1a-c浸润性癌

pT2＝侵入肌肉层(固有肌层)，亚分类pT2a-b

pT3＝穿过肌肉层扩散，亚分类pT3a-b

pT4＝侵入邻近器官如前列腺、子宫、阴道、骨盆壁

另外可以对整个尿路进行放射检查(尿路造影)。作为补充，在显微下检查尿液的恶性细胞。为了进行分期，还使用其它的诊断方法如超声波影像、CT(计算机断层扫描)或MRT(磁共振断层扫描)。通过腹部超声检查可以确定肿瘤的位置和大小。此外上述方法用于检查肾的尿蓄积，并且检验淋巴结和肝脏的转移。

如上所述，对膀胱癌没有有效的早期检测。至今为止，明确的诊断要与创伤性介入如膀胱镜和活组织检查相结合。由此，目的是提供尽可能小创伤的并且快速和低成本诊断膀胱癌以及测定肿瘤分期的过程和方法。

Vlahou et al.，American Journal of Pathology 158(2001)1491-1501描述了利用SELDI对患有“移行细胞癌(TCC)”患者尿样的分析。由于SELDI技术的分辨率较低，因此只能并行检测很少的标记。这导致该诊断的灵敏度和特异性较低，使之在盲测中无效。

W.Liu等人在European Urology 47(2005)456-462中同样描述了尿样的SELDI分析。发现的标记数目较少，只能提供较差的分析特异性。

尽管Vlahou等人和Liu等人使用同样的技术，在两次分析中却发现了不同的标记，这明显说明了所述方法的非有效性。而且所给出的标记质量值如此不精确使得相应的测量不能再现，或者不能将质量明确地归属到单种物质。

发明内容

本发明的目的在于，克服现有技术的所述缺点，尤其是限定明确归属到单种肽的多肽标记，并且所述多肽标记适合用于诊断膀胱癌和/或确定肿瘤分期。

现在令人惊奇地发现，对象试样中的特定肽标记既可以用于诊断膀胱癌，还可以用于评估膀胱癌的肿瘤分期。

因此本发明涉及对象试样中至少一种多肽标记的是否存在或强度用于诊断膀胱癌的用途，其中所述多肽标记选自多肽标记编号1至编号836，其通过表1中给出的分子质量和迁移时间来表征。

表1：用于诊断膀胱癌的多肽标记以及它们的分子质量和迁移时间(CE时间)：

根据本发明，可以诊断非常早期的膀胱癌。由此可以在早期通过已知的方法治愈该疾病。另外，本发明能够廉价、快速和可靠地评估肿瘤分期，以及在部分非创伤性操作或只最小创伤性操作的情况下进行诊断。

借助于毛细管电泳(CE)来测定迁移时间，比如在实施例中第二项中所述的。在该实施例中，在施加的30kV电压下在90cm长、内径(ID)为50μm、外径(OD)为360μm的玻璃毛细管中进行测定。使用例如30％甲醇、0.5％甲酸的水溶液作为流动溶剂。