[发明专利]单剂量CD20特异性结合分子的用途

说明书

[0001]本申请要求于2005年7月25日申请的美国临时专利申请号60/702,498和2006年7月27日申请的美国临时专利申请号60/702,875的优先权益，所述专利申请各自通过引用结合到本文中。

发明领域

[0002]本发明提供使用单剂量CD20特异性结合分子来治疗涉及异常B细胞活性的疾病的材料和方法。

发明背景

[0003]人体免疫系统的通常作用是保护机体免受外来物质和病原体的损害。免疫系统保护机体的一种方式是通过产生称为B淋巴细胞或B细胞的特化细胞。B细胞产生抗体，抗体与外来物质或病原体结合并在某些情况下介导对外来物质或病原体的破坏。

[0004]在某些情况下，人体免疫系统、尤其是人体免疫系统B淋巴细胞出错，就会生病。多种癌症都涉及不受控制的B细胞增殖。还有多种自身免疫性疾病也涉及B细胞产生的抗体，这些抗体并不是与外来物质和病原体结合，而是与机体部分结合。另外，还有多种自身免疫性和炎性疾病在其病理过程中涉及B细胞，例如通过将不适当的B细胞抗原呈递给T细胞或通过涉及B细胞的其它途径。例如，易患自身免疫性疾病的B细胞缺陷型小鼠就不会患上自身免疫性肾病、脉管炎或产生自身抗体。(Shlomchik等，J Exp.Med.1994，180：1295-306)。有趣的是，当进行实验性诱发时，同样的易患自身免疫性疾病、但具有B细胞而在产生免疫球蛋白方面有缺陷的小鼠却会患上自身免疫性疾病(Chan等，J Exp.Med.1999，189：1639-48)，这表明B细胞在自身免疫性疾病发生方面扮演的角色整体不可或缺。

[0005]B细胞可以根据其细胞表面分子而鉴定。CD20是第一个用单克隆抗体鉴定的人B-细胞谱系特异性表面分子。它是非糖基化的疏水性35kDa B细胞跨膜磷蛋白，其氨基端和羧基端都位于胞内。Einfeld等，EMBO J.1988，7：711-17。所有正常成熟B细胞都表达CD20，但前体B细胞或浆细胞却不表达CD20。尚未鉴定出CD20的天然配体，而CD20在B细胞生物学中的功能也尚未完全了解。

[0006]抗CD20单克隆抗体影响B细胞的活力和生长。(Clark等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1986，83：4494-98)。CD20的广泛交联可引起B淋巴瘤细胞系的细胞凋亡(Shan等，Blood 1998，91：1644-52)，已经报道CD20与细胞表面的交联可增加信号转导的数量并增强信号转导的动力学，正如测定细胞底物的酪氨酸磷酸化所检测的那样。(Deans等，J.Immunol.1993，146：846-53)。因此，除了因补体和ADCC机制所致的细胞耗竭(cellular depletion)之外，Fc-受体与CD20单克隆抗体在体内结合也可通过CD20交联而促使恶性B细胞凋亡，这与以下理论是一致的：在SCID小鼠模型中对人淋巴瘤的CD20治疗有效性取决于Fc-受体与CD20单克隆抗体的结合(Funakoshi等，J.Immunotherapy1996，19：93-101)。CD20多肽中多个跨膜结构域的存在(Einfeld等，EMBO J.1988，7：711-17；Stamenkovic等，J.Exp.Med.1988，167：1975-80；Tedder等，J.Immunol.1988，141：4388-4394)，在抗体结合后阻止CD20内化，这被认为是B细胞恶性肿瘤治疗的重要特征，当将鼠CD20单克隆抗体1F5注射到患有B细胞淋巴瘤的患者时，导致恶性细胞的显著耗竭并导致部分临床反应(Press等，Blood 1987，69：584-91)。

[0007]因为正常成熟B细胞也表达CD20，所以正常B细胞因抗CD20抗体治疗而耗竭(Reff等，Blood 1994，83：435-445)。然而，在治疗完成之后，正常B细胞可从CD20阴性B细胞前体中再生；因此，用抗CD20治疗的患者不会经受明显的免疫抑制。

[0008]CD20由B细胞来源的恶性细胞表达，包括B细胞淋巴瘤和慢性淋巴细胞性白血病(CLL)。前B细胞恶性肿瘤(例如急性成淋巴细胞性白血病)不表达CD20。因此，CD20是治疗B细胞淋巴瘤、CLL和病因涉及B细胞的其它疾病的良好靶标。其它B细胞障碍包括自身免疫性疾病，其中自身抗体是在B细胞分化成浆细胞时产生的。