[发明专利]包括SORF构建体的多基因表达和使用多蛋白、前体蛋白和蛋白酶解的方法

权利要求书

1.用于产生一个或多个重组蛋白产物的包括sORF插入片段的表 达载体；所述sORF插入片段包括编码第一个多肽的第一个核酸序列， 编码第一个蛋白裂解位点的第一个插入核酸序列，和编码第二个多肽 的第二个核酸序列；其中将编码所述第一个蛋白裂解位点的所述插入 核酸序列可操纵地置于所述第一个核酸序列和所述第二个核酸序列之 间；并且其中所述表达载体能够表达在所述第一个蛋白裂解位点可裂 解的sORF多肽。

2.权利要求1的表达载体，其中所述第一个蛋白裂解位点包括自 我加工裂解位点。

3.权利要求1或2的表达载体，其中所述自我加工裂解位点包括 蛋白内含子片段或修饰的蛋白内含子片段，其中修饰的蛋白内含子片 段允许所述第一个多肽和所述第二个多肽的裂解但不容许所述第一个 多肽和所述第二个多肽的完全连接。

4.权利要求1或2的表达载体，其中所述自我加工裂解位点包括 hedgehog片段或修饰的hedgehog片段，其中修饰的hedgehog片段允 许所述第一个多肽与所述第二个多肽的裂解。

5.权利要求1-4任一项的表达载体，其中第一个多肽和第二个多 肽能够多亚基装配。

6.权利要求1-5任一项的表达载体，其中所述第一个多肽和第二 个多肽中的至少一个能够胞外分泌。

7.权利要求1-6任一项的表达载体，其中所述第一个多肽和第二 个多肽中的至少一个是哺乳动物来源的。

8.权利要求1-7任一项的表达载体，其中所述第一个多肽和第二 个多肽中的至少一个包括免疫球蛋白重链或其功能片段。

9.权利要求1-8任一项的表达载体，其中所述第一个多肽和第二 个多肽中的至少一个包括免疫球蛋白轻链或其功能片段。

10.权利要求1-9任一项的表达载体，其中所述第一个多肽包括免 疫球蛋白重链或其功能片段，并且所述第二个多肽包括免疫球蛋白轻 链或其功能片段；并且其中所述第一个和第二个多肽是任何次序的。

11.权利要求1-10任一项的表达载体，其中所述第一个多肽和第 二个多肽合起来能够以多亚基装配来结合，形成功能片段或其他抗原 识别分子。

12.权利要求1-11任一项的表达载体，其中所述第一个多肽是所 述第二个多肽的上游。

13.权利要求1-12任一项的表达载体，其中所述第二个多肽是所 述第一个多肽的上游。

14.权利要求1-13任一项的表达载体，进一步包括编码第三个多 肽的第三个核酸序列，其中将所述第三个核酸序列可操纵地置于所述 第二个核酸序列之后；并且其中所述第三个序列可以独立地与所述第 一个或第二个核酸序列中的任一个相同或不同。

15.权利要求14的表达载体，其中所述第一个、第二个和第三个 多肽中的至少两个合起来能够以多亚基装配来结合。

16.权利要求1-15任一项的表达载体，进一步包括编码第二个蛋 白裂解位点的第二个插入核酸序列，其中将所述第二个插入核酸序列 可操纵地置于所述第一个和所述第二个核酸序列之后；并且其中所述 第二个插入序列可以与所述第一个插入核酸序列相同或不同。

17.权利要求1-16任一项的表达载体，进一步包括编码第三个多 肽的第三个核酸序列，和编码第二个蛋白裂解位点的第二个插入核酸 序列；其中第二个插入核酸序列和第三个核酸序列以该次序可操纵地 置于所述第二个核酸序列之后。

18.权利要求1-17任一项的表达载体，其中所述第三个核酸序列 编码免疫球蛋白重链、轻链或各自的功能片段。

19.权利要求14-18任一项的表达载体，其中所述第三个核酸序列 编码免疫球蛋白轻链或其功能片段。

20.权利要求14-18任一项的表达载体，其中所述第三个核酸序列 编码免疫球蛋白重链或其功能片段。