[发明专利]新型重组人丙型肝炎病毒样颗粒及其生产方法有效
申请号: | 200680036003.4 | 申请日: | 2006-09-29 |
公开(公告)号: | CN101278042A | 公开(公告)日: | 2008-10-01 |
发明(设计)人: | 田边纯一;曾根三郎;胁田隆宇;石井孝司;铃木亮介;铃木哲朗;宫村达男 | 申请(专利权)人: | 日本国立感染症研究所;财团法人东京都医学研究机构;东丽株式会社 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;C12N15/09 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 郭文洁;刘玥 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新型 重组 人丙型 肝炎 病毒 颗粒 及其 生产 方法 | ||
1. 生产重组丙型肝炎病毒样颗粒的方法,该方法包含向(i)的细胞中导入(ii)的载体,培养该细胞,回收生成的病毒样颗粒;其中所述
(i)的细胞中保有RNA复制子,该复制子含有下述的碱基序列,所述碱基序列包含来自选自基因型1a、1b、2a、2b、3a和3b的丙型肝炎病毒株的至少一种病毒株的基因组RNA的5’非翻译区,编码NS3蛋白质、NS4A蛋白、NS4B蛋白、NS5A蛋白和NS5B蛋白的碱基序列,3’非翻译区;
(ii)的载体表达下述丙型肝炎病毒株的核心蛋白、E1蛋白、E2蛋白和p7蛋白,所述的丙型肝炎病毒株是选自基因型1a、1b、2a、2b、3a和3b的丙型肝炎病毒株的至少一种的、与上述(i)的中的相同或不同的丙型肝炎病毒株。
2. 权利要求1的方法,其中,上述(i)的基因型1b的丙型肝炎病毒株是con1株,上述(i)的基因型2a的丙型肝炎病毒株是JFH1株。
3. 权利要求1的方法,其中,上述(ii)的基因型1a的丙型肝炎病毒株是H77c株、1株、H株、和HC-J1株。
4. 权利要求1的方法,其中,上述(ii)的基因型1b的丙型肝炎病毒株是J1株、con1株、TH株、J株、JT株、和BK株。
5. 权利要求1的方法,其中,上述(ii)的基因型2a的丙型肝炎病毒株是JFH1株、HC-J6株、JCH1株、和J6CF株。
6. 权利要求1的方法,其中,上述(ii)的基因型3a的丙型肝炎病毒株是NZL1株、K3a/650株、452株、和E-b1株。
7. 权利要求1的方法,其中,上述(ii)的基因型3b的丙型肝炎病毒株是Tr株。
8. 权利要求1的方法,其中,上述(ii)的载体是痘苗病毒载体或含有EF-1α启动子的载体。
9. 权利要求1的方法,其中,上述RNA复制子进一步含有至少一个内部核糖体进入位点,即IRES,序列和/或至少一个外源基因。
10. 权利要求1的方法,其中,上述IRES序列和/或外源基因位于上述5’非翻译区和上述NS蛋白质编码序列之间。
11. 权利要求1的方法,其中,上述细胞是动物细胞。
12. 权利要求11的方法,其中,上述动物细胞是Huh7细胞、HepG2细胞或由这些细胞衍生的株化细胞。
13. 重组丙型肝炎病毒样颗粒,该病毒颗粒是按照权利要求1的方法生成的、具有感染性但不具有传播力的病毒颗粒。
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