[发明专利]荧光分光分析装置

说明书

技术领域

本发明涉及一种荧光分光分析装置。

背景技术

荧光相关分光分析法(FCS法)是一种通过在显微镜视野的微小观测区域内解析荧光分子的布朗运动所造成的光的波动，求得荧光强度的自相关函数，解析每个分子的扩散时间和平均分子数的方法。例如在《荧光相关分光法的1分子检测》金城著、蛋白质核酸酵素、1999，vol.44N091431-1438中所详细叙述的。

荧光互相关分光分析法(FCCS法)是一种通过求得不同的荧光信号间的互相关函数，解析两者的关联性的方法，用于以2色的荧光色素标识的分子间的相互作用的解析，例如，“Dual-Color Fluorescence Cross-CorrelationSpectroscopy for Multicomponent Diffusional Analysis inSolution”，Petra.Schwille et al，Biophysical journal 1997，72，1878-1886和“Adynamic view of cellular processes by in vivo fluorescence auto-andcross-correlation spectroscopy，Petra.Schwille et al，Methods 29(2003)74-85”中所详细叙述的。荧光互相关分光分析法适用于扩散时间少的蛋白质的相互作用等。同样的解析法中有共焦点荧光一致分析(CFCA法)，它在Confocalfluorescence coincidence analysis(CFCA)，winkler etal.，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.96：1375-1378，1999中被详细叙述。

在互相关分光分析法(FCCS法)中，当使用了在荧光光谱中有重叠的两个荧光色素时，受交调失真引起的测量误差的影响，不能正确地进行互相关运算。

发明内容

本发明是考虑这种实际状况而发明的，其目的在于提供一种荧光分光分析装置，能够不受由交调失真引起的测量误差的影响，正确地进行互相关运算。

本发明的荧光分光分析装置，具有激励光学单元，对试样的特定部位错开时间交替地照射波长或强度不同的光；荧光检测单元，检测从上述试样产生的荧光；信号处理单元，对上述荧光检测单元检测出的信号进行信号处理；以及运算单元，用于对上述信号处理单元生成的信号进行相关分析。

附图说明

图1概括地表示本发明的第一实施方式的荧光分光分析装置。

图2表示图1所示的激励光照射部的结构例。

图3表示图1所示的激励光照射部的其他的结构例。

图4表示图1所示的荧光分光分析装置的动作流程图。

图5表示图1所示的荧光分光分析装置的信号的时间图。

图6概括地表示本发明的第二实施方式的荧光分光分析装置。

图7概括地表示本发明的第三实施方式的荧光分光分析装置。

图8A表示图7的信号处理部的运算用数据生成和运算部的解析处理的流程图的一部分。

图8B表示图7的信号处理部的运算用数据生成和运算部的解析处理的流程图的一部分。

图9表示通道的结构和数值。

图10表示对应于图5的第一荧光检测信号的第一荧光的数据。

图11表示对应于图10的数据的第一荧光的分配加权系数。

图12表示将第一荧光和第二荧光的数据重构而得到的数据表。

图13表示将第一荧光和第二荧光的加权系数重构而得到的加权系数表。

图14表示第一荧光的数据间的积和计算。

图15表示第一荧光和第二荧光的数据间的积和计算。

图16概括地表示本发明的第四实施方式的荧光分光分析装置。

图17表示对应于在图16的装置中得到的第一荧光和第二荧光的波动的、包含波动信号的时间序列混合信号。

图18表示从图17的时间序列混合信号中提取出的伪第一荧光检测信号。

图19表示从图17的时间序列混合信号中提取出的伪第二荧光检测信号。

图20表示在荧光光谱有重叠的两个荧光色素中，产生交调失真的情形。

具体实施方式

以下，参照附图说明本发明的实施方式。