[发明专利]在转基因芸苔科和亚麻科植物中生产γ－亚麻酸和/或十八碳四烯酸的方法

权利要求书

1.在芸苔科(Brassicaceae)或亚麻科(Linaceae)转基因植物中生 产γ-亚麻酸(18:3^Δ6，9，12)或十八碳四烯酸(18:4^{Δ6，9，12，15})或者γ-亚麻酸(18:3 ^Δ6，9，12)和十八碳四烯酸(18:4^{Δ6，9，12，15})的方法，其中转基因植物基于总脂肪酸 含量包含至少10％重量的油酸，并且所述方法包括下列步骤：

a)向油料植物中引入核酸序列，所述核酸序列编码报春花属 (Primula)物种的Δ6-去饱和酶，并且所述Δ6-去饱和酶优先利用α-亚麻酸 而非亚油酸作为底物，

b)在转基因植物中表达该核酸编码的Δ6-去饱和酶，

c)生长并收获植物，

其中编码报春花属物种的Δ6-去饱和酶的核酸序列选自：

i)SEQ ID NO：1所示的核酸序列，

ii)由于遗传密码的简并性，可衍生自SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的 核酸序列。

2.根据权利要求1的方法，其中为了表达权利要求1(a)、(b)和(c)的核 酸序列，将权利要求1(a)、(b)和(c)的核酸序列有效地与启动子或终止子或 者启动子和终止子连接。

3.根据权利要求1所述的方法，其中Δ6-去饱和酶活性导致植物中增加 的Δ6-C₁₈-脂肪酸含量。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中Δ6-去饱和酶具有对 α-亚麻酸的底物特异性，其比对亚油酸的底物特异性高出大于20倍。

5.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中Δ6-去饱和酶仅接受 α-亚麻酸作为其底物并且不转化亚油酸。

6.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中不饱和脂肪酸γ-亚麻 酸(18:3^Δ6，9，12)或(18:4^{Δ6，9，12，15})或者γ-亚麻酸(18:3^Δ6，9，12)和(18:4^{Δ6，9，12，15})在油 料植物的种子中增加。

7.根据权利要求6所述的方法，其中从收获的植物中分离种子。

8.根据权利要求1-3的方法，其中不饱和脂肪酸γ-亚麻酸(18:3^Δ6，9，12) 或(18:4^{Δ6，9，12，15})或者γ-亚麻酸(18:3^Δ6，9，12)和(18:4^{Δ6，9，12，15})以油、脂类的形式 或者以游离脂肪酸的形式从芸苔科转基因植物或它们的种子中分离。

9.根据权利要求8的方法，其中油或脂类中存在的不饱和脂肪酸以游 离脂肪酸的形式分离。

10.根据权利要求8的方法，其中油类、脂类或游离脂肪酸与其它动物、 微生物或植物的油类、脂类或脂肪酸混合以得到脂肪酸组合物。

11.根据权利要求10的方法，其中将油类、脂类或游离脂肪酸或者脂 肪酸组合物添加至食品、饲料、化妆品或药物。

12.经分离的核酸序列，其编码具有Δ6-去饱和酶活性的多肽并且其中 编码的Δ6-去饱和酶优先利用α-亚麻酸而非亚油酸作为底物，所述核酸序列 选自：

a)SEQ ID NO：1所示的核酸序列，

b)由于遗传密码的简并性，可衍生自SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的 核酸序列。

13.根据权利要求12的经分离的核酸序列，该序列来源于植物。

14.根据权利要求12或13的经分离的核酸序列，该序列来源于报春花 科(Primulaceae)。

15.蛋白质，其由根据权利要求12-14中任意一项所述的经分离的核酸 序列编码。