[发明专利]用于转化木质素纤维素生物质为乙醇的嗜热有机体

权利要求书

1.分离的有机体，所述有机体发酵分解纤维素的底物以至少90％ 理论产率的浓度生产乙醇，其中所述有机体不表达丙酮酸脱羧酶。

2.生产乙醇的方法，所述方法包括：

转化天然有机体产生如权利要求1所述的分离的有机体以提供转 化的宿主；和

在适合条件下经足以使得糖化和发酵底物的时段，在含有包括选 自葡萄糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖、果糖、纤维二糖、蔗 糖、麦芽糖、木聚糖、甘露聚糖、淀粉及其组合的物质的所述底物的 培养基中培养所述转化的宿主。

3.转化的有机体，所述有机体包括：

在天然状态下包含至少一种基因的革兰氏阳性菌，其中所述至少 一种基因赋予革兰氏阳性菌生成乙酸发酵产物的能力；

被转化为消除所述至少一种基因表达的革兰氏阳性菌。

4.如权利要求3所述的革兰氏阳性菌，其中所述革兰氏阳性菌为 热厌氧杆菌属的成员。

5.如权利要求3所述的革兰氏阳性菌，其中所述革兰氏阳性菌为 解糖热厌氧杆菌(Thermoanaerobacterium saccharolyticum)。

6.如权利要求3所述的革兰氏阳性菌，其中所述至少一种基因编 码乙酸激酶的表达。

7.如权利要求3所述的革兰氏阳性菌，其中所述至少一种基因编 码磷酸转乙酰酶的表达。

8.如权利要求3所述的革兰氏阳性菌，其中所述至少一种基因包 括多种基因。

9.如权利要求8所述的革兰氏阳性菌，其中所述多种基因编码乙 酸激酶和磷酸转乙酰酶的表达。

10.如权利要求9所述的革兰氏阳性菌，其中所述革兰氏阳性菌 被进一步转化以消除赋予所述革兰氏阳性菌生成乳酸发酵产物的能力 的一种或多种基因的表达。

11.如权利要求3所述的革兰氏阳性菌，其中所述革兰氏阳性菌 被进一步转化以消除赋予所述革兰氏阳性菌生成乳酸发酵产物的能力 的一种或多种基因的表达。

12.如权利要求11所述的革兰氏阳性菌，其中所述至少一种基因 编码乳酸脱氢酶的表达。

13.生产乙醇的方法，所述方法包括：

转化天然有机体产生如权利要求11所述的革兰氏阳性菌以产生 转化的细菌宿主；和

在适合条件下经足以使得糖化和发酵底物的时段，在含有包括选 自葡萄糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖、果糖、纤维二糖、蔗 糖、麦芽糖、木聚糖、甘露聚糖、淀粉及其组合的物质的所述底物的 培养基中培养所述转化的细菌宿主。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述细菌宿主为解糖热厌氧 杆菌。

15.如权利要求13所述的方法，其中所述基因编码乳酸脱氢酶、 乙酸激酶和磷酸转乙酰酶的表达。

16.命名为ALK1并以专利保藏命名号PTA-7206保藏的微生物的 生物纯培养物。

17.分离的多核苷酸，所述多核苷酸包括：

(a)SEQ ID NO：10的序列；

(b)SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10的序列；或

(c)与(a)或(b)的序列具有至少约90％序列一致性的序列。

18.如权利要求17所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸与(a)或 (b)的序列具有约95％序列一致性。

19.包括如权利要求18所述的分离的多核苷酸的载体。

20.遗传上被工程化为表达如权利要求18所述的多核苷酸互补序 列的宿主细胞。

21.如权利要求20所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞为细菌细 胞。