[发明专利]获取间质干细胞的方法

权利要求书

1、一种获取间质干细胞(MSC)的方法，该方法包括通过分散胚胎干细胞(ES)集落，或者其子代细胞，并在没有共培养物的情况下在不含血清而含有FGF2的培养基中进行增殖。

2、根据权利要求1的方法，其特征在于，胚胎干细胞集落为人胚胎干细胞集落(hESC)。

3、根据权利要求1或2的方法，其特征在于，胚胎干细胞集落用胰蛋白酶进行分散。

4、根据权利要求1、2或3的方法，其特征在于，该方法包括在把细胞移植出去之前用胰蛋白酶分散铺满培养板中的人胚胎干细胞(hESC)。

5、根据任何前述权利要求的方法，其特征在于，没有共培养物的情况包括在没有细胞饲养层的情况下对细胞进行培养。

6、根据任一前述权利要求的方法，其特征在于，细胞在培养物基质上进行增殖。

7、根据任一前述权利要求的方法，其特征在于，培养基质包括明胶铺底的平板。

8、根据任一前述权利要求的方法，其特征在于，不含血清的培养基包括浓度约为5ng/ml的FGF2。

9、根据任一前述权利要求的方法，其特征在于，不含血清的培养基进一步包括PDGF AB，优选浓度约为5ng/ml。

10、根据任一前述权利要求的方法，其特征在于，不含血清的培养基中添加了血清替换介质。

11、根据任一前述权利要求的方法，其特征在于，在融合时通过胰蛋白酶消化细胞以1∶4的比例分裂。

12、根据任一前述权利要求的方法，其特征在于，进一步包括从基于细胞表面标记物表达的经增殖的细胞中选择间质干细胞的步骤。

13、根据权利要求12的方法，其特征在于，通过选择高表达一种或多种下列表面标记物的细胞来从选择间质干细胞：ANPEP(CD13；LAP1；PEPN；gp150：NM_001150.1)；ENG

(END；ORW；HHT1；ORW1；CD105：NM_000118.1)；SCN9A(PN1；NE-NA：NM_002977.1)；TRPV2(VRL；VRL1；VRL-；MGC12549：NM_06113.3)；RAMP1(：NM_005855.1)；F2RL2(PAR3：NM_004101.2)；NTSR1(NTR：NM_002531.1)；GABRA2(：NM_000807.1)；SLC16A4(MCT4：NM_004696.1)；ITGA4(CD49D：NM_000885.2)；NCAM2(NCAM21；MGC51008：NM_004540.2)；I11R1(P80；IL1R；IL1RA；CD121A；D2S1473；IL-1R-α：NM_000877.2)；PDGFRA

(CD140A；PDGFR2：NM_006206.2)；

VCAM1(INCAM-100：NM_080682.1)；SSFA2(CS1；CS-；KRAP；SPAG13；KIAA1927：M_006751.3)；TRHDE(PAP-II：NM_013381.1)；EDG2(LPA1；edg-2；vzg-1；Gpcr26；Mrec1.3；rec.1.3：NM_001401.3)；NT5E(eN；NT5；NTE；eNT；CD73；E5NT：NM_002526.1)；以及

FLRT2(KIAA0405：NM_013231.2)；FAP(FAPA；DPPIV；SEPRASE：M_004460.2)。

14、根据权利要求12或13的方法，其特征在于，表明标记物包括CD105(登录号NM_000118.1)。

15、根据权利要求12或13的方法，其特征在于，表面标记物包括CD73(登录号NM_002526.1)。