[发明专利]评估人半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的浊度测定法免疫测定

权利要求书

1.包含适用于浊度测定法测量的纳米颗粒的纳米颗粒-抗体缀合物用 于制备在浊度测定法免疫测定中使用的产品中的应用，所述免疫测定用 于评估人体液样品中的人半胱氨酸蛋白酶抑制剂C，其中：

a)所述纳米颗粒-抗体缀合物用于与所述样品接触而形成测定混合 物，其中所述纳米颗粒用包括抗-人半胱氨酸蛋白酶抑制剂C抗体或所述 抗体的抗原结合片段的蛋白质物质的壳包被，以结合所述半胱氨酸蛋白 酶抑制剂C，其中所述包被的纳米颗粒具有在58nm和200nm之间的平 均直径，其中，所述人半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的含量通过测量所述混 合物的浊度的变化而评估，其中所述抗体的重量比例是基于所述纳米颗 粒-抗体缀合物重量的5％-35％。

2.权利要求1的应用，其中所述抗体是针对人半胱氨酸蛋白酶抑制 剂C的多克隆非人、非啮齿动物抗体。

3.权利要求2的应用，其中所述多克隆抗体是针对人半胱氨酸蛋白 酶抑制剂C的禽类抗体。

4.权利要求2和3中任一项的应用，其中以重量计至少25％的所述 多克隆抗体或片段通过使用人半胱氨酸蛋白酶抑制剂C亲和纯化而获 得。

5.权利要求1的应用，其中所述抗体包括(a)结合人半胱氨酸蛋白 酶抑制剂C的单一表位的单克隆抗体，或(b)一组两种或多种种类的单 克隆抗体，其中每种种类的单克隆抗体结合人半胱氨酸蛋白酶抑制剂C 的不同的表位，或者两种或多种种类的单克隆抗体以不同的结合强度而 结合相同的表位。

6.权利要求5的应用，其中所述单克隆抗体是非人来源的。

7.权利要求1的应用，其中所述包被的纳米颗粒具有80-105nm范 围内的平均直径。

8.权利要求1-3中任一项的应用，其中所述包被的纳米颗粒用抗-人 半胱氨酸蛋白酶抑制剂C抗体和至少一种惰性蛋白质的混合物包被。

9.权利要求8的应用，其中所述惰性蛋白质是亲水性的。

10.权利要求9的应用，其中所述亲水性蛋白质选自血蓝蛋白、 触珠蛋白、白蛋白和运铁蛋白。

11.权利要求1-3中任一项的应用，所述纳米颗粒由聚苯乙烯、聚氯 乙烯、环氧树脂、聚偏1，1-二氯乙烯、聚-α-萘基甲基丙烯酸酯、聚乙 烯萘或它们相对应的共聚物制成。

12.权利要求1-3中任一项的应用，其中所述浊度变化通过在所述测 定混合物在500-600nm范围的波长，以及在32-37℃范围内的温度的光 吸收的变化而测量。

13.权利要求1-3中任一项的应用，其中在形成所述混合物后，将所 述混合物在37℃保持260秒时，关于波长546nm的光的所述浊度的变 化，表示为mAbs单位/cm，是

在所述测定混合物中，在9.9μg半胱氨酸蛋白酶抑制剂C/l的浓度 下，大于15mAbs单位/cm，或者

在所述测定混合物中，在19.8μg半胱氨酸蛋白酶抑制剂C/l的浓度 下，大于30mAbs单位/cm，或者

在所述测定混合物中，在34.1μg半胱氨酸蛋白酶抑制剂C/l的浓度 下，大于75mAbs单位/cm。

14.按照权利要求1-3中任一项的应用，其中在形成所述混合物后， 将所述混合物在37℃保持260秒时，关于波长505nm的光的所述浊度 的变化，表示为mAbs单位/cm，是

在所述测定混合物中，在9.9μg半胱氨酸蛋白酶抑制剂C/l的浓度 下，大于20mAbs单位/cm，或者

在所述测定混合物中，在19.8μg半胱氨酸蛋白酶抑制剂C/l的浓度 下，大于50mAbs单位/cm，或者

在所述测定混合物中，在34.1μg半胱氨酸蛋白酶抑制剂C/l的浓度 下，大于90mAbs单位/cm。