[发明专利]从外消旋 4－(1－氨基乙基 )苯甲酸甲酯通过脂酶催化的对映选择性酰化反应并随后用硫酸沉淀以制备(R)－和(S)－4－(1－铵乙基)苯甲酸甲酯硫酸盐的方法

说明书

本发明涉及制备(R)-和(S)-4-(1-铵乙基)苯甲酸甲酯硫酸盐的新方法。

现有技术

通过与酯的酶催化反应拆分胺的外消旋体的方法是公知的。Kitaguchi 等(J.Amer.Chem.Soc.111，3094-3095，1989)描述了使用丁酸三氟乙基酯 通过枯草溶菌素催化拆分胺的外消旋体。但是，此反应的对映选择性在很 大程度上取决于溶剂。即使使用所描述的最合适的溶剂(3-甲基-3-戊醇)， 也仅仅达到中等选择性。

WO 91/19002描述了一种手性富集外消旋伯胺的方法，其中通过枯草 溶菌素催化使胺与乙酸乙酯或丁酸乙酯反应。但是，达到的对映异构过量 是不满意的。另外，需要一到数星期的长反应时间。

Gotor等(J.Chem.Soc.Chem.Commun.957-958，1988)描述了用乙 酸乙酯通过猪胰脂酶(PPL)将2-氨基丁-1-醇进行对映选择性酰化。在这 种情况下，所用的酯(乙酸乙酯)也用作溶剂。在使用其它溶剂或其它酶 时没有达到满意的效果。

Brieva等(J.Chem.Soc.Chem.Commun.，1386-1387，1990)描述了从 外消旋伯胺通过与2-氯丙酸酯在枯草溶菌素催化下在己烷或柱状假丝酵母 脂酶中在3-甲基-3-戊醇中进行酰胺的对映选择性合成。

WO 95/08636描述了一种从相应的外消旋体制备旋光性伯胺和仲胺的 方法，其中在水解酶的存在下进行对映选择性酰化反应。

但是，以此方式制备的旋光性胺根据其结构在储存时不是很稳定，并 发生其它副反应。

所以，本发明的目的是提供一种方法，其能确保以高的产率、光学纯 度和高的储存稳定性制备旋光4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯。

发明内容

本发明涉及一种制备旋光4-(1-铵乙基)苯甲酸甲酯硫酸盐的方法，其中 使外消旋4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯与酰化试剂在脂酶存在下反应，得到 4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯，随后通过加入硫酸沉淀出4-(1-铵乙基)苯甲酸 甲酯硫酸盐。

适用于本发明方法的酰化试剂优选是羧酸酯。特别优选的是所谓的活 化羧酸酯，其中酸组分具有位于羰基碳原子的α位上的杂原子取代。甲氧 基乙酸酯优选用作酰化试剂。羧酸酯的醇组分优选含有具有1-6个碳原子 链长的烷基醇，其可以是支化或未支化的，也可以被取代。甲氧基乙酸异 丙基酯是特别合适的酰化试剂。

许多酶可以用作本发明方法中的脂酶。特别优选的是微生物酶，它们 可以例如从酵母或细菌分离出来。特别合适的脂酶是来自绿脓杆菌的那些， 例如Amano P，或来自绿脓杆菌DSM 8246或南极假丝酵母(Candida antarctica)的脂酶。以商品名Novozyme 435(Lipase B，南极假丝酵母) 销售的Novozyme系列产品特别适用于本发明方法。

所用的酶可以以天然或固定化形式使用。

合适的溶剂一般是有机溶剂。反应特别好地在醚中进行，例如在MTBE 或THF中，或在烃中，例如己烷、环己烷、甲苯或卤代烃，例如二氯甲烷。 但是，反应也可以在不存在溶剂的情况下进行。

酰化试剂与外消旋4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯在酶催化下的反应一般 在室温进行。反应时间是1-48小时，优选5-24小时。

按照每摩尔4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯计，加入1-2摩尔、优选1.2-1.6 摩尔的酰化试剂。

脂酶的用量取决于脂酶的类型和酶制备的活性。对于反应而言最合适 的脂酶用量可以容易地通过简单的初级实验确定。一般，每mmol胺计加 入1000单位的脂酶。

反应进程可以通过常规方法容易地跟踪，例如通过气相色谱。在外消 旋拆分的情况下，合理的是在外消旋胺的转化率为50％时停止反应。这一 般通过从反应空间除去催化剂进行，例如过滤出酶。

外消旋4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯与脂酶的对映选择性反应使得从一 种对映体得到了相应的酰化产物(酰胺)，而另一种对映体保持不变。目 前存在的胺和酰胺的混合物可以容易地通过常规方法分离。萃取或蒸馏方 法例如非常适合于分离胺和酰胺的混合物。被选择性酰化的对映体取决于 脂酶的选择，并可以容易地通过初级实验确定；Novozyme435例如选择 性地酰化了(R)-4-(1-氨基乙基)苯甲酸甲酯。