[发明专利]多组分核酸酶及其使用方法

权利要求书

1.包含至少两种或更多种寡核苷酸组分的组合物，其中至少第一 寡核苷酸组分和第二寡核苷酸组分在多组分核酸酶组装易化子的存在 下自组装形成催化活性多组分核酸酶，其中每一所述至少第一和所述 第二寡核苷酸组分包含底物臂部分、选自NNNAGCNNNWCGK或 GGMTMGHNDNNNMGD的催化核部分和感应臂部分；

其中当自组装时，所述第一和第二寡核苷酸组分的所述感应臂部 分用作所述多组分核酸酶的感应臂，所述第一和第二寡核苷酸组分的 所述底物臂部分用作多组分核酸酶的底物臂，并且所述第一和第二寡 核苷酸组分的所述催化核部分用作所述多组分核酸酶的催化核；

其中所述多组分核酸酶的所述感应臂与所述多组分核酸酶组装易 化子相互作用以便维持所述第一和第二寡核苷酸组分的邻近，使得它 们各自的催化核部分缔合形成所述多组分核酸酶的所述催化核，所述 催化核能够酶切至少一种底物，并且其中所述多组分核酸酶的所述底 物臂接合底物使得所述多组分核酸酶的所述催化核能够酶切所述底 物；并且

其中所述组装易化子和所述底物包含核酸，所述感应臂与所述组 装易化子杂交并与其互补部分碱基配对，并且所述底物臂通过互补碱 基配对接合所述底物。

2.如权利要求1所述的组合物，其中所述组装易化子是待鉴定、 检测或定量的靶。

3.如权利要求2所述的组合物，其中所述靶是核酸。

4.如权利要求1所述的组合物，其还包含稳定因子寡核苷酸组分， 所述稳定因子寡核苷酸组分通过互补碱基配对来结合和稳定所述感应 臂部分的至少之一。

5.如权利要求1所述的组合物，其中所述第一寡核苷酸组分的所 述催化核部分和所述第二寡核苷酸组分的所述催化核部分由选自以下 的序列组成：SEQ ID NO151和167；SEQ ID NO152和168；SEQ ID  NO152和169；SEQ ID NO152和170；SEQ ID NO149和168；SEQ  ID NO153和168；SEQ ID NO156和168；SEQ ID NO157和168； SEQ ID NO159和168；SEQ ID NO161和172；或者SEQ ID NO150 和166。

6.如权利要求1所述的组合物，其中所述寡核苷酸组分或组装易 化子或底物的至少之一或上述的组合还包含至少一种适体。

7.如权利要求6所述的组合物，其中所述适体由核酸或肽的至少 之一或其组合组成。

8.如权利要求6所述的组合物，其中所述适体由多肽组成。

9.如权利要求6所述的组合物，其中所述适体由蛋白组成。

10.如权利要求1所述的组合物，其中所述第一或所述第二寡核 苷酸组分或所述组装易化子或所述底物的至少之一还包含能够形成发 夹结构的至少一部分自互补序列。

11.如权利要求10所述的组合物，其中所述发夹结构抑制所述多 组分核酸酶的自组装。

12.如权利要求1-2和4-11中任一权利要求所述的组合物，其中 所述组装易化子是核酸或蛋白。

13.如权利要求1所述的组合物，其中所述底物还包含至少一种 纳米颗粒。

14.如权利要求1-11中任一权利要求所述的组合物，其中所述底 物包含可检测部分和淬灭基团部分，其中当所述多组分核酸酶酶切所 述底物时，所述可检测部分提供的可检测作用增加或减少。

15.如权利要求1-11中任一权利要求所述的组合物，其中所述多 组分核酸酶对所述底物的所述酶切提供可检测作用。

16.如权利要求1-2和4-11中任一权利要求所述的组合物，其中 所述寡核苷酸组分、所述组装易化子或所述底物的至少之一选自 DNA、RNA、核酸类似物、肽-核酸嵌合体或上述的任意组合。