[发明专利]水包油乳液佐剂含量降低的流感疫苗

说明书

本文引用的所有文件全文纳入本文作为参考。

技术领域

本发明属于用佐剂配制疫苗来提供保护以抵御流感病毒感染的领域。

背景技术

目前常规使用的流感疫苗一般不含佐剂。参考文献1的第17和18章详细描述了这些疫苗。它们基于活病毒或灭活的病毒，灭活疫苗可以基于完整的病毒、“裂解”病毒或纯化的表面抗原(包括血凝素和神经氨酸酶)。血凝素(HA)在灭活的流感疫苗中是主要免疫原，参考HA水平标准化疫苗剂量，疫苗通常含有约15μg HA/毒株。

流感爆发期需要大量流感疫苗，但难以增加疫苗供应从而满足如此巨大的需求。因此，除了生产更多疫苗抗原，有人提出可以使用较低含量的抗原/毒株，同时使用佐剂来弥补减少的抗原剂量。还有人提出在流行间期采用相同的方案，从而例如能覆盖更多人群而无需提高生产水平。

早已能购得一种佐剂配制的疫苗，即FLUAD^TM产品。该疫苗中的佐剂是水包油乳液。FLUAD^TM产品将抗原和乳液佐剂预先混合在预填充注射器中提供。产品数据表显示各剂量体积是0.5ml，含有15μg HA/毒株、9.75mg角鲨烯、1.175mg聚山梨醇酯80、1.175mg失水山梨糖醇三油酸酯、0.66mg柠檬酸钠、0.44mg柠檬酸和注射用水。如参考文献2所披露的，以1∶1的体积比混合2×乳液与2×抗原溶液以制备疫苗，从而得到含1×浓度的乳液和抗原的最终溶液。参考文献8的第10章进一步解释了该1∶1混合比例。

本发明的目的是提供含水包油乳剂的其它改进流感疫苗(对于流行期和流行间期使用)和它们的制备方法。

发明内容

除了FLUAD^TM产品，在人中检验了实验性MF-59佐剂配制的流感疫苗，包括抗原剂量降低的疫苗。例如，在参考文献3和4中，检验了基于H5N3毒株的MF-59佐剂配制的疫苗，其中所含的HA是正常剂量(15μg)、双倍剂量(30μg)或半剂量(7.5μg)。然而，在所有情况中，患者均接受含全量(1×)MF59佐剂的0.5ml体积预混合疫苗。

现在，发明人意识到并不总是需要全量的水包油乳液佐剂。因此，本发明减少了流感疫苗所需的乳液佐剂的量，从而能用给定量的乳液制备更多疫苗和/或使为获得给定数量的疫苗剂量所必须生产的乳液量最小。如果快速需要大量(疫苗)，降低乳液佐剂的总需求是有利的。

本领域早已知晓，通过混合(i)水包油乳液和(ii)流感病毒抗原的水性制品可以方便地制备这些疫苗。然而，本发明的混合方法在各方面均不同于现有技术，与FLUAD^TM产品相比，方法的选择对剂量和体积有各种影响。例如：

·与现有技术一样，使用基本上相同体积的组分(i)和(ii)。然而，与现有技术的不同在于使用低于0.25ml的乳液可以降低制备最终疫苗所需的体积。如果增加组分(ii)中的抗原浓度以弥补体积降低，则可维持最终疫苗中的抗原量(15μg/毒株)；如果维持组分(ii)中的抗原浓度(15μg/毒株/0.25ml)以弥补体积降低，则最终疫苗的HA剂量降低。

·与现有技术不同的是可利用过量体积的组分(ii)。如果抗原浓度的降低与增加的量相匹配，则可维持最终疫苗中的抗原量(15μg/毒株)；如果抗原浓度降低超过了增加的量，则最终抗原剂量降低(＜15μg/毒株)；如果维持抗原浓度(15μg/毒株/0.25ml)，则最终疫苗的HA剂量增加(＞15μg/毒株)。

因此，本发明提供制备佐剂配制的流感疫苗的方法，包括混合基本上相同体积的(i)水包油乳液和(ii)流感病毒抗原水性制品的步骤，其中组分(ii)中的血凝素的浓度大于60μg/流感病毒毒株/ml。通过等体积混合，HA浓度在混合后＞30μg/流感病毒毒株/ml。因此，该方法获得0.5ml体积中最终HA浓度＞15μg/毒株的组合物，所以给予＜0.5ml的该疫苗可以实现15μg/毒株的剂量。