[发明专利]细胞展示抗体文库

权利要求书

1.一种产生在细胞表面上展示抗体或抗体片段的细胞文库的方法，所述方法包括：

a.用含多核苷酸载体的文库感染细胞群体，所述多核苷酸编码在细胞膜胞外表面上展示的重组抗体或其片段；和

b.在能够在细胞表面上表达抗体或其片段的条件下培养所述细胞群体。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗体或其片段包含使所述抗体靶向细胞表面的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列融合于所述抗体的重链或轻链的C-末端。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述氨基酸序列包含跨膜区或GPI锚定信号序列。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述载体是病毒载体。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述载体是腺病毒载体、杆状病毒载体、腺伴随病毒载体、疱疹病毒载体或慢病毒载体。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗体或其片段是选自IgA、IgE、IgM、IgD、IgY或IgG的免疫球蛋白类型。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗体或其片段是鼠抗体、嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗体或其片段包括Fc区，其中所述Fc区是天然产生的Fc区，或者所述Fc区包含至少一个氨基酸取代、插入或其组合。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗体或其片段包含重链可变区、轻链可变区，或重链和轻链可变区。

10.一种分离具有所需特性的抗体或其片段的方法，所述方法包括：

对权利要求1所述方法产生的细胞文库进行选择，从而分离表达具有所需特性的抗体或其片段的至少一种细胞。

11.如权利要求10所述的方法，还包括由所述分离细胞分离多核苷酸的步骤。

12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，用标记试剂培育所述细胞文库并根据所述标记试剂与细胞文库的结合分选所述细胞文库，从而进行选择。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述标记试剂是抗原或效应物分子。

14.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述所需特性是与特定抗原结合。

15.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述所需特性是与效应物分子结合。

16.一种在细胞表面上展示抗体或其片段的方法，所述方法包括：

a.用含有编码重组抗体或其片段的多核苷酸的载体感染细胞，其中所述抗体或其片段包含使所述抗体靶向细胞表面的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列融合于所述抗体的重链或轻链的C-末端；和

b.在能够在细胞表面上表达抗体或其片段的条件下培养所述细胞群体。

17.一种对效应物分子亲和力降低的含有变异Fc区的抗体或其片段，其中所述变异Fc区包含选自下组的至少一个氨基酸取代、插入或其组合：W277T；K246R/L251E/T260R；InR234/235；InV235/236；InR236/237；InR237/238；InV238/239；InN238/239；InL238/239；InE238/239；InG238/239；InS239/240；InG240/241；InE240/241；InG240/241/I198T；InL238/239/P238Q；InE238/239/V348A；InS239/240/V266A；InR237/238/G236A。

18.如权利要求17所述的抗体或其片段，其特征在于，所述效应物分子选自C1q、FcγRIIIA。

19.如权利要求17所述的抗体或其片段，其特征在于，所述抗体的效应物功能降低。

20.如权利要求19所述的抗体或其片段，其特征在于，所述效应物功能是ADCC。