[发明专利]凋亡细胞在离体产生调节T细胞中的应用

权利要求书

1.一种产生具有调节活性的T细胞(T reg)的方法，该方法包括将 CD4+白细胞与自体凋亡的外周血单核细胞(AC)一起孵育，其中所述 孵育在CD4+∶AC比率为1∶10至10∶1下进行。

2.权利要求1的方法，其中所述孵育在足以产生T reg的时间和 条件下进行。

3.权利要求1的方法，该方法还包括筛选表达CD4的白细胞以 获得CD4+细胞的步骤。

4.权利要求1的方法，其中所述孵育在CD4+∶AC比率为2∶1至 1∶2下进行。

5.权利要求1的方法，其中所述AC通过细胞凋亡诱导处理获得。

6.权利要求5的方法，其中细胞凋亡诱导处理是ECP方法，该 方法使用光活化化合物以及激活光活化化合物波长的光。

7.权利要求6的方法，其中所述光活化化合物是补骨脂素，所述 光是UVA。

8.权利要求7的方法，其中所述补骨脂素是8-MOP。

9.权利要求1的方法，其中所述孵育还包括加入进一步提高T reg 产生或功能的因子。

10.权利要求9的方法，其中所述因子包括激素、蛋白质和药物 中的至少一种。

11.权利要求9的方法，其中所述因子是抗体。

12.权利要求10的方法，其中所述因子选自至少一种以下的因 子：TGFβ、αMSH、抗CD46、IL-10、维生素D₃、地塞米松、雷帕霉 素和IL-2。

13.权利要求12的方法，其中所述因子是IL-10。

14.权利要求13的方法，其中IL-10存在的浓度为1ng/ml至 100ng/ml。

15.权利要求14的方法，其中IL-10存在的浓度约为20ng/ml。

16.权利要求1的方法，其中所述孵育进行1天至14天。

17.权利要求16的方法，其中所述孵育进行约8天。

18.权利要求1的方法，该方法还包括在孵育时加入抗原以产生 调节针对该抗原的免疫应答的Treg。

19.权利要求18的方法，其中所述抗原是同种异体抗原。