[发明专利]用于递送和表达抗原的促凋亡细菌和组合物

权利要求书

1.修饰细菌以增强所述细菌的免疫原性的方法，其包括遗传上改 变所述细菌以表达抗凋亡酶的显性失活突变体，由此所述细菌在受试 者中具有增强的免疫原性。

2.经修饰的细菌，其依照权利要求1的方法制备。

3.免疫原性组合物，其包含权利要求2的经修饰的细菌。

4.修饰减毒细菌以增强所述减毒细菌的免疫原性的方法，其包括 遗传上改变所述细菌以表达抗凋亡酶的显性失活突变体，由此所述细 菌在受试者中具有增强的免疫原性。

5.权利要求1和4的方法，其中所述细菌选自结核分枝杆菌、牛 分枝杆菌、牛分枝杆菌菌株BCG、BCG亚株、鸟分枝杆菌、胞内分枝杆 菌、非洲分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌、溃疡分枝杆菌、 鸟分枝杆菌副结核亚种、星状诺卡氏菌、其他诺卡氏菌属物种、嗜肺 军团菌、其他军团菌属物种、伤寒沙门氏菌、其他沙门氏菌属物种、 志贺菌属物种、鼠疫耶尔森氏菌、溶血巴斯德菌、多杀巴斯德菌、其 他巴斯德菌属物种、胸膜炎肺炎放线杆菌、单核细胞增生李斯特氏菌、 依氏李斯特氏菌、流产布鲁杆菌、其他布鲁杆菌属物种、反刍类考德 里氏体、肺炎衣原体、沙眼衣原体、鹦鹉衣原体、伯氏柯克斯体、其 他立克次氏体属物种、埃里希氏体属物种、金黄色葡萄球菌、表皮葡 萄球菌、酿脓链球菌、无乳链球菌、炭疽杆菌、大肠杆菌、霍乱弧菌、 弯曲杆菌属物种、脑膜炎奈瑟氏球菌、淋病奈瑟氏球菌、铜绿假单胞 菌、其他假单胞菌属物种、流感嗜血杆菌、杜氏嗜血杆菌、其他嗜血 杆菌属物种、小肠结肠炎耶尔森氏菌、及其他耶尔森氏菌属物种。

6.权利要求1和4的方法，其中所述显性失活突变体是SodA的 显性失活突变体，其中天然存在的核酸中的核苷酸缺失、插入和/或置 换编码干扰所述生物的SOD活性的分子。

7.权利要求1和4的方法，其中所述显性失活突变体是谷氨酰胺 合酶的显性失活突变体，其中天然存在的核酸中的核苷酸缺失、插入 和/或置换编码干扰所述生物的谷氨酰胺合酶活性的分子。

8.权利要求6和7的方法，其中所述细菌是BCG。

9.权利要求8的方法，其包括进一步的促凋亡修饰。

10.权利要求9的方法，其中所述进一步的促凋亡修饰包含选自 SigH的失活、sigE的失活、SecA2的失活、硫氧还蛋白的失活、硫氧 还蛋白还原酶的失活和谷氧还蛋白的失活的一种或多种修饰。

11.权利要求8的方法，其中所述显性失活突变体是具有在第28 位上的组氨酸和第76位上的组氨酸缺失的突变体SodA。

12.权利要求8的方法，其中所述显性失活突变体是具有在第28 位上的组氨酸或第76位上的组氨酸缺失的突变体SodA。

13.权利要求8的方法，其中所述显性失活突变体是具有在第54 位上的谷氨酸缺失的突变体SodA。

14.权利要求8的方法，其中所述显性失活突变体是具有在第54 位上的谷氨酸缺失和第28位上用精氨酸置换组氨酸的突变体SodA。

15.权利要求10、11、12、13或14的方法，其中所述细菌包含 SodA的显性失活突变体和sigH的活性降低突变。

16.权利要求10、11、12、13或14的方法，其中所述细菌包含 SodA的显性失活突变体和secA2的活性降低突变。

17.权利要求10、11、12、13或14的方法，其中所述细菌包含 SodA的显性失活突变体、sigH的活性降低突变和secA2的活性降低突 变。

18.权利要求10、11、12、13或14的方法，其中所述细菌包含 SodA的显性失活突变体、glnAl的显性失活突变体、sigH的活性降低 突变和secA2的活性降低突变。

19.权利要求8的方法，其中所述细菌包含glnAl的显性失活突 变。