[发明专利]用于发酵和培养的方法、植物发酵提取物、植物发酵提取物组合物、用于制备脂多糖的方法和脂多糖

说明书

技术领域

本发明涉及用于通过包含免疫增强剂的可食革兰氏阴性菌发酵的 方法，所述细菌当加入用于植物和动物的药物、准药物、化妆品、功 能性食物、饲料、肥料和沐浴剂中时是安全的，所述动物如哺乳动物 (特别地家畜和宠物动物)包括人类、鸟类(特别是家鸡和宠物鸟类)、 两栖动物、爬行动物、鱼类(特别是宠物鱼类)和无脊椎动物，包含 通过发酵获得的免疫增强剂的培养溶液，和通过使免疫增强剂浓缩获 得的提取物。

背景领域

对于哺乳动物(特别地家畜和宠物动物)包括人类、鸟类(特别 是家鸡和宠物鸟类)、两栖动物、爬行动物、鱼类(特别是宠物鱼类) 和无脊椎动物以及植物，建立用于预防或治疗疾病的方法包括感染防 护技术是紧迫的问题。此外，为了实现这点，非常需要其中不使用化 学药品、不发生环境污染、不发生抗药菌和不在人体中发生累积的方 法。本发明人已发现对于上述问题，衍生自天然产物的免疫增强剂安 全地实现关于预防和治疗疾病的作用(非专利文献1)。作为其的一 个例子，可以使用得自成团泛菌(Pantoea agglomerans)的脂多糖， 所述成团泛菌是小麦中的常住菌(非专利文献1)。已知鲎阳性糖脂 具有强免疫增强活性(非专利文献2)。所谓的脂多糖也包括在这个 类别中。脂多糖已知是革兰氏阴性菌细胞外壁的主要组分以及 Coley′s疫苗接种的主要成分之一，且具有有效的免疫增强活性(非 专利文献3)。

本发明人已发现鲎阳性糖脂存在于小麦中，其的部分是小麦共生 细菌的脂多糖，并且这些强烈激活天然免疫性(非专利文献4)。上 文2种通过经皮或口部施用安全且强烈地激活天然免疫性，并且显示 出用于预防和治疗广泛多样疾病包括传染病的作用(非专利文献5)。 此外，本发明人已报道衍生自成团泛菌的脂多糖含量不仅通过用成团 泛菌使小麦粉发酵得到增加，所述成团泛菌是小麦粉中的常住菌，而 且其为包含衍生自小麦的组分的新型免疫增强剂的发酵的小麦提取物 发挥感染防护效果，作为代替畜牧业和水产业领域中的抗生素化学药 品的安全和可靠的天然材料。

脂多糖的基本结构由称为脂质A的脂质和与之共价结合的各种糖 (多糖)组成。脂质A后的区域由R核随后为O抗原多糖部分组成， 所述R核在相关细菌中采取相对一致的结构，所述O抗原多糖部分取 决于细菌种类采取不同结构(非专利文献7)。O抗原也具有相同寡糖 的重复结构，其表征LPS(脂多糖)(非专利文献1)。因此，脂多糖 一般形成具有多重分子量的混合物。还已知取决于脂多糖衍生自其的 微生物脂多糖具有不同结构。例如，衍生自沙门菌属(Salmonella) 的脂多糖和衍生自大肠杆菌(Escherichia coli)的脂多糖在结构以 及生物活性方面不同。然而，因为一般不易于确定脂多糖的结构，所 以衍生自革兰氏阴性菌的脂多糖的结构和功能的细节未知。因此，描 述基于功能差异脂多糖一般具有新型结构。

同时，在近期研究中已证实脂多糖经由TLR4激活天然免疫性(非 专利文献6)。已发现脂多糖的脂质A部分是与TLR4结合所需的，和 多糖部分在很大程度上影响TLR4的细胞内信号转导的效率。根据上 文，推测脂多糖的细胞应答中的差异指示结构差异。

证实脂多糖的经皮或口部施用是可靠和安全的对于确定脂多糖的 有用性是重要的。因此，照惯例着重在食物生产和发酵中使用的革兰 氏阴性菌。即，如果鲎阳性糖脂和脂多糖存在于在食物生产中使用的 革兰氏阴性菌中，且作为可食产物与发酵产物一起提供，那么这个事 实证实鲎阳性糖脂和脂多糖具有被食用的经验。这是强烈指出鲎阳性 糖脂和脂多糖的经皮或口部施用是可靠和安全的发现，并且同时使用 这些物质应使得能够开发新卫生保健产品和药物如化妆品和食物。

非专利文献1：Chie Kohchi等人，″Natural immunity regulatory action of fermented wheat extract，”New Food Industry(2006) 第48卷，第19-27页

非专利文献2：Ulmer，A.J.等人，″Lipopolysaccharide： Structure，Bioactivity，Receptors，and Signal Transduction.” Trends in Glycoscience and Glycotechnology，(2002)第14卷， 第53-68页