[发明专利]对细胞表面靶具有结合特异性的双特异性配体及其使用方法

权利要求书

1.含有第一多肽域和第二多肽域的配体，所述第一多肽域具有对 第一细胞表面靶具有结合特异性的结合位点，所述第二多肽域具有对 第二细胞表面靶具有结合特异性的结合位点，

其中所述第一细胞表面靶和所述第二细胞表面靶是不同的，所述 第一细胞表面靶和所述第二细胞表面靶存在于病原细胞上；

其中所述配体结合所述病原细胞上的所述第一细胞表面靶和所 述第二细胞表面靶；和

其中所述配体被所述病原细胞内化。

2.权利要求1的配体，其中所述配体优先被所述病原细胞内化。

3.权利要求1或2的配体，其中所述配体基本上没有被单阳性细 胞或正常细胞内化。

4.权利要求1-3中任一项的配体，其中所述配体选择性地结合所 述病原细胞。

5.权利要求1-4中任一项的配体，其中所述第一多肽域以低亲和 力结合所述第一细胞表面靶，所述第二多肽域以低亲和力结合所述第 二细胞表面靶。

6.权利要求5的配体，其中根据表面等离子共振测定，所述第一 多肽域和所述第二多肽域各自以介于约10μM至约10nM之间的亲和 力(KD)结合它们相应的细胞表面靶。

7.权利要求4的配体，其中当所述配体以介于1pM至约150nM 之间的浓度存在时，所述配体选择性地结合所述病原细胞。

8.权利要求1-7中任一项的配体，其中所述具有对第一细胞表面 靶具有结合特异性的结合位点的第一多肽域和所述具有对第二细胞 表面靶具有结合特异性的结合位点的第二多肽域分别是第一免疫球 蛋白单可变区和第二免疫球蛋白单可变区。

9.权利要求8的配体，其中所述第一免疫球蛋白单可变区和/或 所述第二免疫球蛋白单可变区是V_HH。

10.权利要求8的配体，其中所述第一免疫球蛋白单可变区和所 述第二免疫球蛋白单可变区独立地选自人V_H、人V_L。

11.权利要求8或10的配体，其中所述第一免疫球蛋白单可变区 具有对细胞表面靶具有结合特异性的结合位点，所述细胞表面靶选 自：CD38、CD138、癌胚抗原(CEA)、CD56、血管内皮生长因子(VEGF)、 表皮生长因子受体(EGFR)和HER2。

12.权利要求11的配体，其中所述第二免疫球蛋白单可变区具有 对细胞表面靶具有结合特异性的结合位点，所述细胞表面靶选自 CD38、CD138、CEA、CD56、VEGF、EGFR和HER2，前提条件是 所述第一免疫球蛋白单可变区和所述第二免疫球蛋白单可变区不结 合同一细胞表面靶。