[发明专利]与PEA－15相互作用的新型化合物

说明书

本发明涉及能够与PEA-15蛋白(星形胶质细胞中富含的磷蛋白， 其具有15kDa的分子量)相互作用的化合物，它们的荧光衍生物，和 这些化合物在筛选和诊断方法中的应用，以及药物组合物。

PEA-15是具有130个氨基酸的小的细胞质蛋白质，所述蛋白质在 脑中，特别是星形胶质细胞中大量表达，并且普遍地在许多其他组织 中表达，但表达程度较低。

该蛋白质的结构(在脊椎动物动物中非常保守)在N-末端包含具 有80个氨基酸的死亡效应结构域(DED)和NES(核输出信号)结构 域以及在C-末端包含低组织化结构，所述低组织化结构包含通过蛋白 激酶C(PKC)和通过II型依赖于钙/钙调蛋白的蛋白激酶进行的磷酸 化的位点。

PEA-15的基因组序列是由4个外显子组成并在基因组DNA的大约 10.2kb上延伸(Wolford等人，2000，Gene，241：143)。

PEA-15在体内以不同的形式存在：非磷酸化形式、单和二磷酸化 形式；每一种形式表现出不同的生物学活性。

PEA-15是可通过其不同功能结构域以及根据其磷酸化程度与许 多伙伴相互作用的多功能蛋白质(Renault等人，Biochem. Pharmacol，2003，66：1581)。迄今为止，已鉴定了参与由该蛋白质 执行的多种功能的PEA-15的7个伙伴，即FADD、胱天蛋白酶8、 Omi/HtraA2、ERK1/2、Akt、Rsk2和磷脂酶D1。通过这些多种相互作 用，PEA-15似乎在许多生理学和/或病理学细胞过程中起着至关重要 的作用。

已显示，该蛋白质尤其具有下列性质：抑制凋亡、抑制细胞进入 细胞周期、参与由H-Ras癌基因的表达所抑制的整联蛋白信号传导的 重建、抑制细胞增殖以及参与葡萄糖的运输和胰岛素的分泌(Renault 等人，Biochem.Pharmacol.，2003，66：1581)。

例如，已观察到，星形胶质细胞中PEA-15的表达的抑制导致星形 胶质细胞对由TNFα诱导的细胞凋亡的敏感性增加(Kitsberg等人，J. Neurosci.，1999，19：8244)，以及该蛋白质的表达的减少引起不同 的细胞系例如星形胶质细胞、淋巴细胞和肝细胞的增殖增加 (Formstecher等人，Dev.Cell.，2001，1：239)。还观察到，该 蛋白质的表达还抑制细胞迁移。

此外，该蛋白质还能够参与脑原发性肿瘤的发生和/或发展，以及 参与转移过程。

例如，在不同肿瘤例如神经胶质瘤、卵巢癌、肾癌、乳腺癌、肝 细胞癌、淋巴瘤或黑素瘤中已观察到PEA-15的表达增加(Hwang等人， Genomics，1997，42：540；Bera等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA， 1994，91：9789)。

此外，该蛋白质在转基因小鼠中的过量表达增加了它们对于化学 诱导的皮肤癌的敏感性(Formisano等人，Oncogene，2005，24： 7012)。

相反地，PEA-15在组织中的表达引起抑制该组织对于肿瘤细胞侵 袭的容许。

还显示了，通过减少PEA-15的表达可使乳腺癌细胞对化学疗法敏 感(Stassi等人，Cancer Res.，2005，65：6668)。

WO 2004/108961提出了PEA-15作为乳头状瘤的标记物和治疗靶 标的用途。

此外，已在患有II型糖尿病的患者的成纤维细胞、横纹肌和脂肪 组织中观察到PEA-15的过量表达(Condorelli等人，EMBO.J.，1997， 17：3858)，并且显示了，对该蛋白质的表达的抑制使得能够恢复响 应于葡萄糖的胰岛素分泌。

还在某些炎症过程中观察到该蛋白质的过量表达。

EP 1,189,060提出了PEA-15作为神经变性疾病中的标记物和治 疗靶标的用途。

因此，PEA-15似乎可用作许多病理学状况的治疗靶标。然而，迄 今为止，不存在能够调节该蛋白质的活性的容易获得的化合物。

此外，也不存在能够允许容易地筛选此类化合物的工具。

因此，对于容易地获得能够与PEA-15相互作用并调节其活性的化 合物存在需要。

还对于拥有能够调节PEA-15的生物学活性的化合物的筛选工具 存在需要。