[发明专利]用于诊断胃癌的作为标记的MAC-2BP

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于胃癌的诊断标记。更具体地，本发明涉及一种用于胃癌的诊断试剂盒，其包括可以检测被确认为胃癌标记的Mac-2BP(Mac-2结合蛋白)的试剂。本发明还涉及一种使用该试剂盒用于检测该胃癌标记的方法。

背景技术

人体肿瘤表达并分泌各种被称为癌症标记抗原的特异性分子。目前，已经提供大量用于癌症抗原的诊断和治疗的抗原。迄今，已经发现了60多种肿瘤标记。在它们之中，商业上应用的一些癌症标记包括AFP(肝癌)，CEA(结肠直肠癌，胃癌，胰脏癌，乳腺癌)，HCG(绒毛膜癌)，PAP(前列腺癌)，NSE(肺癌)，C15-3(乳腺癌)，和CA19-9(结肠直肠癌，胰腺癌)。胃癌是世界上表现最高发病率和死亡率的癌症之一，并且在包括韩国，日本，中国，俄罗斯，香港，和中欧，中美和南美的国家和斯堪的纳维亚半岛的不同国家中，胃癌是死亡的主要原因。在胃癌的诊断和治疗中，标记或治疗剂是非常有用的，然而，标记或治疗剂还没有被开发出来。

起初，Mac-2BP(Mac-2结合蛋白)被称为90kd。Mac-2BP是一种分泌性糖蛋白，并在血浆、尿液、母乳和其它人体体液中被发现，并作为结合到半乳凝素-1，-3和-7上的配体。迄今为止，已经报导在包括乳腺癌，肺癌，结肠直肠癌和卵巢癌的不同癌症病人的血浆中Mac-2BP以高水平分泌总计若干μg/ml。对于乳腺癌和肺癌，已经报导Mac-2BP的表达和分泌的水平可以作为指示病人的转移阶段和存活率的标记。然而，在前述报导中完全提到Mac-2BP用于诊断乳腺癌的应用。

对于本发明，本发明人在与癌细胞的发生和产生有关的基因上进行了大量并彻底的研究，结果发现Mac-2BP基因在胃癌细胞中特异性的表达并且在Mac-2BP的表达和分泌与胃癌的发生之间存在紧密的关系。

发明内容

因此，本发明的一个目的是提供一种用于胃癌的诊断试剂盒，其包括可以检测该胃癌标记Mac-2BP的试剂。

本发明的另一个目的是提供一种使用该试剂用于检测该胃癌标记的方法。

附图说明

通过下面结合附图的详细描述，本发明的上述和其它目的，特征和其它优点将被更加清楚的理解，其中：

图1A显示通过Northern印迹测定，与作为对照组的使用实体瘤标记豆类天冬氨酸蛋白内切酶(Legumain)的原发性癌组织比较，Mac-2BP转录物在转移性的继发性癌组织中以较高的水平表达；

图1B显示通过流式细胞计量术测定的在胃癌细胞株中Mac-2BP蛋白的特异性表达，其中每种细胞株用甲醛固定并用针对Mac-2BP的单克隆抗体染色；

图2A显示使用细胞株的细胞溶胞产物，通过Mac-2BP ELISA测定的在胃细胞株中Mac-2BP蛋白的表达水平；

图2B显示使用细胞培养液的浓缩物，通过ELISA测定从胃细胞株SNU-484、-620、和-638中分泌的Mac-2BP水平，其不同于细胞内的表达水平；

图3显示与正常组织(3A和3C)比较，Mac-2BP在胃癌组织(3B和3D)中以较高水平的过度表达，其使用Mac-2BP的单克隆抗体，通过免疫组织化学测定；和

图4显示使用取自胃癌病人和正常人体的血清，通过ELISA测定的分泌到细胞外环境的Mac-2BP水平。

具体实施例

在一个方面，本发明涉及一种用于胃癌的诊断试剂盒，其包括一种可以确定Mac-2BP基因的mRNA或蛋白水平的试剂。

另一方面，本发明涉及一种用于检测胃癌标记的方法，其包括将生物样品与确定Mac-2BP基因的mRNA或蛋白水平的试剂进行接触。

在此使用的术语“标记”意思是一种可以在正常细胞之中鉴别癌细胞的材料，并且它可以是Mac-2BP基因的核苷酸标记或是Mac-2BP蛋白的多肽标记。与正常细胞比较，在胃癌细胞中，这些标记的表达是增加的。

在此使用的术语“诊断”意思是鉴别胃癌的存在或特征，并且特别地，其与胃癌的转移有关，胃癌的转移包括转移是否已经发生和是否有转移的可能性。