[发明专利]治疗肿瘤疾病的方法

说明书

本发明涉及医学领域，特别是使用含有遗传材料的制剂来治疗患者 的方法，可用于治疗由癌基因、抑癌基因(oncosuppressor)中的突变 以及经历恶性转化的细胞中全基因纯合化(total gene homozygotization)所导致的肿瘤疾病。

基于对细胞中的点突变进行修复的治疗方法是已知的[US，No. 5,795,972，1998年8月18日.]。

这种方法显示相对较低的疗效以及有限的施用范围，因为此方法需 要在开始治疗之前精确测定突变。

由于还缺乏特定突变在癌症病因中的可靠证据，因此开发上述方法 需要进行长期的细致研究，以检测出需要校正的具体突变，从而使得有 必要开发出基于对癌症病因的已有知识能够适用的方法，而不注重基因 组中诱导恶性化的具体变化。

涉及局部施用DNA片段以治疗患者皮肤的癌前状态或者晒黑刺激 的方法也是已知的[US，No.5,955,059，1999年9月21日，US，No. 5,470,577，1995年11月28日]。

这些方法的应用有限，因为在这些专利中并未指明具体DNA序列 和DNA来源。他们提出使用来自“任何合适来源”的天然及合成DNA， 例如长度为200bp并可少至单核苷酸及核苷的鲑鱼DNA，包括二聚体， 根据作者的测试，它们是最为有效的。然而，在人体中施用外源DNA 的效果和后果尚未详细研究，这就预先决定了应用这些方法的某些危 险。

与所提出方法本质上最接近的方法是基于激活细胞中的DNA修复， 根据这一方法，将修复酶递送至皮肤细胞中[US，No.5,302,389， 12.04.1994年4月12日(原型)]。

这一最接近的技术方案的缺点是应用领域有限，因为它仅意图用于 治疗皮肤肿瘤疾病，并且不牵涉已有突变的回复。

所有这些均证明，校正遗传突变方法的需求仍然非常受到关注。在 相当程度上，这指的是治疗患有由癌基因和抑癌基因的突变以及全基因 纯合化所导致的肿瘤疾病的个体。

意图解决的问题是扩展应用领域，以及治疗患有由癌基因和抑癌基 因的突变所导致的以及全基因纯合化所导致的肿瘤疾病的患者。

在一个广义的方面中，本发明的技术问题是开发影响癌细胞和整体 肿瘤的方法，其已经在人腺癌细胞培养物和人工诱导小鼠肿瘤的模型中 通过实验证实，该方法以下述方式作用：即细胞在进行逆向遗传转化时 改变基因的内稳态，导致丧失癌细胞的主要特征——其无限增殖活性。

所需结果通过基于将片段化DNA引入所述生物体来治疗肿瘤疾病 的方法而得以实现，其中使用同源DNA片段，其包含生理及遗传上健 康供体的完整基因组。在这种方法中，所引入DNA的量等于或大于患 者血浆及组织液中的自身DNA，但不超过最大可容许量——30μg/ml。

与本文提出的方法相比，目前的文献没有提到使用片段化的遗传健 康DNA对患有肿瘤疾病的患者进行治疗、其在染色体间空间递送和累 积的天然机制，以及所递送片段与相应染色体区域之间的同源交换，所 述区域中带有导致该特定细胞发生癌转化的突变。

因此，本文提出的内容满足新颖性和创造性的标准。

证实本发明还满足(工业)实用性的理论及实验数据在下文给出。

附图说明

图1.图1显示对片段化人胞外DNA取决于细胞接触培养基中DNA 的时间而在MCF-7细胞培养物细胞区室中的分布所进行的分析(天然电 泳条件，培养物生长对数期)。用溴化乙锭染色的琼脂糖胶块示于右侧； 左侧为同一胶块干燥后的X射线图。胶块上方的数字表示培养物与标记的 溴化乙锭和α-dATP^＊一起孵育的时间。胶块右侧和左侧的数字是分子量标 记(kbp)，α是最初的α-dATP^＊前体。