[发明专利]木榄中新黄酮类化合物的分离鉴定及其抗肿瘤用途

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物化学领域，具体涉及一种新的黄酮类化合物的分离和鉴定及其抗子宫颈癌Hela细胞的活性。

背景技术

木榄[Bruguiera gymnorhiza(L.)]是红树科木榄属的一种植物，广泛分布于热带、亚热带潮间带，如：非洲大陆、东南亚、美洲的加勒比海以及我国的广西、广东、海南、台湾和福建沿海等。

长期以来的民间应用实践证明：木榄具有潜在的药用价值，主要表现在清热解毒、止泻、收敛、止血及截疟等方面，被广泛应用于治疗发烧、腹泻、止血、眼疾、咽喉肿痛及对抗疟原虫等，但很少有药效物质基础的报道。

黄酮类化合物是植物中广泛分布的一类次生代谢产物，具有抗氧化、抗菌、消炎、抗肿瘤以及抗病毒等药理活性，黄酮类化合物已成为新药研究过程中重要的先导化合物来源而备受研究人员的关注。

本发明通过研究木榄化学成分，并对所获得的一种新的黄酮类化合物进行抗肿瘤活性检测，旨在获得显效的活性化合物或先导化合物。

(中草药，2005，3：465-467，Mangroves and Salt Marshes，1998，2，133-148.Planta Medica，1996，62：67-69.Biochemical Pharmacology，2006，72：1439-1452.Bioorganic&MedicinalChemistry 2006，14：2966-2971.J of Natural Products，1997，60：884-888.)

发明内容

本发明对木榄设计、分离得到了一种黄酮类新化合物，新化合物结构式为：

命名为7，3`，4`，5`-四羟基-5-甲氧基黄酮(3`，4`，5`-trihydroxy-7-hydroxy-5-methoxyflavone)

本发明采用MTT法对此新化合物进行了抗肿瘤活性检测，实验结果显示此化合物具有抑制子宫颈癌Hela细胞生长的活性，它的IC₅₀为80.5μg/ml。

具体实施方式

实施例1新化合物的提取、分离和鉴定

一实验材料与方法

1样品

木榄样品采自海南省文昌市头苑镇，由海南省东寨港自然保护区钟才荣老师鉴定。

2仪器和试剂

上海申顺生物科技有限公司R-501型旋转蒸发仪；Nicolet Impact 410型红外分光光度计测定(KBr压片)；Bruker AV-300型核磁共振仪；薄层层析及柱层析硅胶均为青岛海洋化工厂产品；工业酒精；其它试剂均为分析纯。

3提取与分离

木榄叶片湿重50kg，用85％乙醇(100Lx5)提取，浓缩至无醇味后溶于水中，过滤弃去黑色沉淀，过滤液浓缩至无乙醇味后用乙酸乙酯萃取，浓缩得浸膏242.0g，以乙醇溶解，加100～200目硅胶350g拌样，通风橱中挥干。以氯仿～甲醇系统梯度洗脱，500ml/瓶接收。经TLC检查，合并相同的组分。80％氯仿/甲醇洗脱部分再经80％氯仿/甲醇硅胶(200-300目)柱层析、Sephadex LH20纯化，得到新化合物。

二新化合的物理化性质、波谱数据及结构确定

黄色针状晶体(MeOH)，IR(KBr)Vmax3346，1631cm^-1，¹H-NMR(MeOD 303K AV-300)¹³C-NMR(MeOD 303K AV-300)，见Tablel；Formular：C₁₆H₁₂O₇(ESI-MS：m/z[M+H]⁺317.0，[M+Na]⁺339.0；HRESIMS：m/z[M+H]⁺317.0664)；

Table 1：¹NMR(500MHz，J in Hz)and ¹³C NMR(125MHz)

spectroscopic data for the compound in MeOD