[发明专利]一种防治炎症相关心脑血管疾病的药物靶标及其抑制剂

说明书

技术领域

本发明涉及一种防治炎症相关心脑血管疾病的新药物靶标及其抑制剂的医药用途，具体为非肌肉肌球蛋白重链9[nonmuscle myosin heavy chain 9(MyH9)作为防治炎症相关心脑血管疾病的新药物靶标及其抑制剂鲁斯可皂苷元及其苷在防治与肿瘤分化转移、青光眼等疾病的用途。

技术背景

药物创新研究主要包括两方面内容，一是化合物创新，即根据现有靶标发现新结构类型活性化合物；二是药物靶标创新，即综合运用化学生物学、分子生物学、药理学、生物信息学等方法发现药物作用新靶标和新作用机制及相关的一系列信号转导通路。从源头创新上讲，药物新靶标的发现比化合物创新更具科学价值和实际意义。目前，随着基因组学、蛋白质组学、生物信息学的迅速发展，以现有药物或活性化合物，特别是中草药有效成分或活性天然产物为探针，寻找与其特异结合的蛋白或其它生物大分子是后基因组时代发现药物靶标的另一途径，是近年来新药研制的发展方向和热点。如抗癌天然药物紫杉醇的发现及其生物学和药理学研究，导致抗癌药物新靶标微管蛋白的发现，引起新一轮抗癌药物筛选高潮；以辣椒碱为探针，筛选出非成瘾性镇痛药物靶标，为非成瘾性镇痛药物开发开辟了新方向。

我国具有丰富的中草药资源，中药作为中医用以防病治病的重要手段，蕴涵着丰富的中医理论，与中医治则有密切联系，其作用特点与作用机理可能有别于基于现代医学理论的化学药和西方植物药，中药活性成分是其赖以发挥独特作用的物质基础，因此利用现代多学科交叉技术，寻找发现其直接作用的特异性靶点，将有望真正阐释中药的作用机制，并为反映中医药作用特色的创新药物研制提供新靶标。

麦冬是常用代表性滋阴中药，药性甘、微苦、微寒，归胃、肺心经，具有养阴生津、清心润肺的功效，临床应用十分广泛，作为著名古方生脉散、炙甘草汤等的主要组成药物之一，治疗心血管疾病疗效确切。发明人通过长期大量的前期研究发现，麦冬皂苷类成分，即主要以鲁斯可皂苷元为母核的苷包括C1或C3位连接葡萄糖、鼠李糖、岩藻糖或阿拉伯糖组成的单糖苷、二糖苷、三糖苷，均具有显著的抗炎和心脑血管保护活性，其主要的皂苷元——鲁斯可皂苷元部分是其活性作用中心母核，具有显著抗炎抗血栓活性，强度类似于地塞米松、华法令等，但不影响PGE₂释放、COX-2表达等，无华法令易致出血等副反应，提示其作用有别于糖皮质激素类药物和常用口服抗凝血药。因此，综合利用多学科技术手段，寻找发现鲁斯可皂苷元在心脑血管疾病相关组织细胞中的特异性结合蛋白，并验证该蛋白功能，有望发现与心脑血管疾病等重大疾病相关的新药物靶标，并发现鲁斯可皂苷元与靶蛋白有关的新医药用途。目前尚未见相关文献报道。

目前寻找药物靶蛋白的方法主要有亲和色谱法、噬菌体展示克隆、酵母三杂交系统、药物印迹、DNA芯片技术、磁性纳米探针技术等，各有优缺点。其中亲和色谱法是最经典的一种方法。迄今已成功应用于秋水仙碱、细胞松弛素B、FK506、环孢菌素、E3330等多种药物靶蛋白的搜寻。常见的亲和色谱法有固相特异性洗脱法和药物竞争法。但固相特异性洗脱法易受“亲和柱—靶蛋白”复合体解离速度的影响，而且还须制备无活性结构类似药物的对照柱；药物竞争法由于蛋白会随不溶的药物沉淀，对药物溶解性的要求很高。系列亲和色谱法是2006年报道的一种新的能克服以上缺点的亲和色谱法，至今尚未应用于天然化合物的靶标发现。

发明内容

本发明在国家十一五科技支撑计划子课题(2006BAI08BO5)和国家自然科学基金项目(30672603)资助下，利用系列亲和色谱法发现了麦冬皂甘类活性成分中心母核鲁斯可皂苷元在心脑血管疾病相关细胞、组织中的特异性结合蛋白，并通过ESI-MS和MALDI-TOF-TOF-MS鉴定为非肌肉肌球蛋白重链9(nonmuscle myosin heavy chain 9)(简称MyH9)。MyH9又名Nonmuscle myosin heavy chain II A(简称NMHC-IIA)，是由人第22号染色体上的MyH9基因编码的。广泛分布于血管内皮细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、T细胞、中性粒细胞等多种细胞中。现已发现它在胞内能够与多种蛋白(如：Menin、血管紧张素转化酶、核仁素、β-actin、NMHC-IIB)结合。这说明非肌肉肌球蛋白重链9是一种与生理病理过程密切相关的功能蛋白质。