[发明专利]一种中药材的质量标准指纹图谱的建立方法

说明书

技术领域

本发明属于中药材的质量标准研究领域。涉及用于分析鉴定中药材质量指标的方法。

背景技术

随着中药现代化发展及中药走向国际市场的需要，建立中药指纹图谱具有非常重要的意义。目前的中药指纹图谱多通过薄层色谱(TIC)和高效液相色谱(HPLC)建立，现有的色谱指纹图可以反映中药材的归属及质量，但无法确定色谱峰所对应的是什么物质，给质量控制带来困难。药材质量的优劣与药材中的化学成分组成及其含量有关，现有的色谱指纹图可以评价药材的质量，但只能从图谱的形状和各峰的相对含量来判断，而无法知道具体的化学成分，难以调控有效成分的含量大小，以保持稳定的质量。

发明内容

本发明的目的是为克服目前中药材质量分析和控制方法中所存在的缺陷，提出一种中药材的质量标准指纹图谱的建立方法，该方法用现代的GC-MS方法建立的中药指纹图谱的质量标准，能直观准确地鉴别药材的真伪，评价药材质量，使定性定量控制中药加工过程成为可能。

本发明所提出的中药材的质量标准指纹图谱的建立方法，包括下述步骤：

(1)提取待测中药材中所含的挥发油成分；

(2)用气相色谱-质谱法对提取的挥发油进行分析测定，获取GC-MS总离子流色谱图；

(3)分析GC-MS总离子流色谱图中每个色谱峰对应的化学成分的化学结构，并用面积归一法测定其相对含量；

(4)综合考虑所测中药材在GC-MS总离子流色谱图中测定的含量不少于0.1％的成分以及文献中公开的该药材已知的有效成分，确定不多于15个的有限个该种中药材的主要有效成分作为其特征成分；

(5)在所选择的特征成分中，每种成分选取一个特征离子，并获取该特征离子的EIC(Extract ions chromatogram)质量色谱图，从而得到该中药材各特征成分的多个特征离子的EIC质量色谱图；

(6)将所获取的该中药材各特征成分的多个特征离子的EIC质量色谱建立在一张色谱图上，得到提取多离子重建色谱(Extract multi-ions chromatogram，EMIC)指纹图，即成为所述中药材的质量标准指纹图谱。

步骤(3)采用GC-MS气相色谱-质谱联用仪对提取的挥发油进行分析测定，由GC-MS气相色谱-质谱联用仪生成提取的挥发油的GC-MS总离子流色谱图。

在步骤(4)中所述的文献中公开的该药材已知的有效成分，是指已在现有文献公开的已经明确疗效的化学成分。现有的文献资料中已有许多关于中草药有效成分的研究报道，不同品种的草药的成分可以从《中药大辞典》、《常用中药成分与药理手册》、《中药现代化研究与应用手册》或相关科技的杂志中查阅到。如查当归有效成分：查《常用中药成分与药理手册》(黄泰康主编，中国医药出版社，1994，824-854)，当归的有效成分：蒿本内酯、丁烯基苯酞内酯等。如查草果有效成分：查《常用中药成分与药理手册》(黄泰康主编，中国医药出版社，1994，1376-1377)，草果有效成分：1，8-桉叶素(1，8-cineole)、α-蒎烯(α-pinene)、β-蒎烯(β-pinene)等。

在步骤4中，每种中药材确定的主要有效成分一般为8～12个，以兼顾有效性和可操作性。

上述步骤(5)和步骤(6)可通过发明人自编的多离子重建色谱的软件程序完成，该计算机程序包括下述步骤：

向GC-MS气相色谱-质谱联用仪的输入界面输入由步骤(5)选取的所述多个特征离子的质荷比的步骤；

依次将输入的每个特征离子的提取离子流图从TIC图中得到，然后放置到寄存器R1中进行加和的步骤；

将R1中的数据赋值给寄存器X，最后将X当中的数据用画图的命令显示在质谱数据分析软件的窗口1当中的步骤；

如需要对显示的结果进行积分，则继续执行将寄存器X当中的数据进行积分，然后使用列表命令将结果显示在屏幕上的程序。

本发明所提出的中药材的质量标准指纹图谱的建立方法，通过对中药材中的有效成份的提取和GC-MS分析，在对所获得的GC-MS总离子流(TIC)图中各色谱峰进行结构鉴定，确定有效的特征成份的基础上，构建提取多离子重建色谱(Extract multi-ions chromatogram，EMIC)图，即中药材的质量标准指纹图谱。从而形成一种新的中药质量评价方法，该方法利于定量分析，量化评价指标，以建立质量标准。

本发明可达到的有益技术效果如下：