[发明专利]人TCRVβ7.1_H3F7基因及其筛选方法和应用

权利要求书

1、一种人TCRβ7.1_H3F7基因，其特征是基因序列由942个碱基组成，蛋白序列由312个氨基酸组成，序列表如SEQ ID NO：1。

2、一种权利要求1所述的基因的筛选扩增方法，其特征是包括以下步骤：

(1)T淋巴细胞中提取细胞总RNA，转录成cDNA；

(2)设计引物，以cDNA为模板进行PCR扩增反应；

(3)扩增获得的产物基因克隆入表达载体pcDNA-kan上；

(4)用限制性核酸内切酶EcoRI和HindIII将TCR基因和载体pcDNA-kan进行双酶切，再用T4 DNA连接酶进行连接，最后在含卡那霉素的LB平板上筛选含重组质粒的阳性克隆细菌，将筛选得到的重组子进行测序。

3、根据权利要求2所述的方法，其特征是步骤(2)所述引物为V7CK和C2CK，其序列如下：

V7CK：ATT  GAATTC+GCC+ATGGGCTGCAGGCTGCTCTGC

C2CK：GCC  AAGCTT+CTAGCCTCTGGAATCCTTTCT

引物前端都含有3个保护碱基序列，V7CK引物中还含有限制性内切酶EcoRI的序列和Kozark序列，C2CK引物中含有限制性内切酶HindIII的序列。

4、根据权利要求2所述的方法，其特征是步骤(3)所述克隆选用pcDNA-kan载体多克隆位点中的EcoRI和HindIII位点为基因插入位点。

5、根据权利要求2所述的方法，其特征是步骤(4)所述测序以T7通用引物和BGH反向测序引物作为测序引物。

6、一种权利要求1所述基因的应用，其特征是在制备能识别肿瘤和杀伤肿瘤药物方面的应用。

7、根据权利要求6所述基因的应用，其特征是应用于制备抗肝癌药物或疫苗方面的应用。