[发明专利]转基因阴沟肠杆菌GEI－a及其构建方法和用途有效
| 申请号： | 200710029850.4 | 申请日： | 2007-08-23 |
| 公开（公告）号： | CN101144067A | 公开（公告）日： | 2008-03-19 |
| 发明（设计）人： | 韩日畴;林惠娇;丘雪红;颜珣 | 申请（专利权）人： | 广东省昆虫研究所 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/29;A01N63/02;A01P7/04 |
| 代理公司： | 广州科粤专利代理有限责任公司 | 代理人： | 余炳和 |
| 地址： | 510260广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 转基因 阴沟 杆菌 gei 及其 构建 方法 用途 | ||
【权利要求书】：
1.一种转基因阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)GEI-a，其特征是：该菌株是利用Tn5转座子将大豆丝氨酸蛋白酶抑制剂基因插入到阴沟肠杆菌的基因组DNA中，用于表达抑制昆虫肠道胰蛋白酶的工程菌，该菌株保存于中国典型培养物保藏中心，编号为CCTCC M207071。
2.一种权利要求1所述的转基因阴沟肠杆菌GEI-a的构建方法，其特征包括下列步骤：
(1)提取大豆Glycine max L种子的总RNA，反转录克隆丝氨酸蛋白酶抑制剂Tia基因；
(2)利用pET-32a(+)质粒，于大肠杆菌BL21(DE3)中原核表达所克隆基因；
(3)利用微转座子载体pMini-Tn5，将Tia基因置入转座单位里，构建“自杀性”工程质粒pMini-Tn5-Tia；
(4)将构建的工程质粒pMini-Tn5-Tia导入阴沟肠杆菌中；
(5)测定Tia基因整合到肠道细菌阴沟肠杆菌基因组DNA上，获得表达Tia蛋白的工程菌，即得到转基因阴沟肠杆菌GEI-a。
3.权利要求1所述的转基因阴沟肠杆菌GEI-a作为制备杀灭入侵红火蚁诱饵药剂的应用。
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