[发明专利]一种毒死蜱农药降解菌、其菌剂和制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，尤其是涉及一种毒死蜱农药降解菌、其菌剂和制备方法。

技术背景

水果、蔬菜是人们必不可少的生活必需品，农药是果蔬生产过程中防治病虫草害、保证产量质量必不可少的选择。

确保果蔬农药残留符合食品卫生标准，涉及每位公民的生命健康，已成为各级政府实施“菜篮子、果篮子”工程的重要内容。同时，随着生活水平的不断提高，“绿色食品、无公害果蔬”日益深入民心，果蔬农药残留亦成为公众关注的焦点之一。

在利益驱动、病虫危害、使用者素质等各种因素综合作用下，农药的不科学使用情况普遍严重，并直接导致了果蔬农药残留的严重超标，威胁人们的生命安全与健康，而且对很大程度上影响了我国果蔬出口创汇。国际市场以农药残留为最大的直接切入点，对我国出口果蔬树起严格的“绿色壁垒”。国家出入境检验检疫总局、农业部等部门指出农药残留已成为我国果蔬出口创汇的最主要阻碍因素和“瓶颈”，必须高度重视果蔬农药残留的源头控制及治理新技术研究。

果蔬农药残留治理新技术是食品安全生产的关键配套技术。控制农药污染源以及残留治理新技术研究是解决食品中农药残留的基本办法。目前减少农药残留污染的研究大多集中在选用高效低毒低残留化学农药和生物农药、改进剂型及应用技术方面，但是收效甚微。农产品生产过程中农药的使用不可缺少，寻求高效、安全、经济的农产品农药残留处理新技术，解决病虫害防治用药与农药残留的矛盾，已成为科研工作者亟待解决的具有重大经济和社会意义的重大科研命题。利用微生物降解剂处理农产品，是农药残留控制处理的新领域、新途径，许多发达国家和大公司企业投入巨资以从事农药残留高效降解菌的研究开发。实验室和实际应用研究都表明利用微生物来降解果蔬中的农药残留，可有效提高农产品的品质和经济价值。

毒死蜱是近年来使用非常广泛的一种农药，目前还没有发现专门针对毒死蜱农药的降解菌剂。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种新的毒死蜱农药降解菌。

本发明另一目的是提供了实现所述毒死蜱农药降解菌的方法。

本发明的还有一个目的是提供了使用所述毒死蜱农药降解菌制备菌剂的方法，得到的菌剂可以使毒死蜱等有机磷农药的残留量降低85％以上，具有较高的降解效果，生产和使用成本较低。

本发明的技术方案是提供一种毒死蜱农药降解菌，其特征在于所述降解菌为枝孢菌属Cladosporium sp.的Hu-01菌株，菌种保藏号为CCTCC M 207111，该菌株ITS序列分析的Genebank登陆号为EF405864。

所述毒死蜱农药降解菌的制备方法，包括以下步骤：

菌种采用砂土管保存法保存。将毒死蜱农药降解菌Hu-01的菌种在培养皿上活化，接种于试管斜面。按照以下配方配制查彼氏培养基(Czapek medium)：硝酸钠：2.0g，氯化钾：0.5g，硫酸镁：0.5g，磷酸氢二钾：1.0g，硫酸铁：0.01g，蔗糖：30.0g，蒸馏水：1000mL。在pH7.0的液体查彼氏培养基中，接入0.1g湿菌体，在28℃，150r/min的摇床中培养1-7d。

本发明提供了采用所述毒死蜱农药降解菌制备降解菌剂的方法，包括以下步骤：

(1)将毒死蜱农药降解菌Hu-01的菌种在培养皿上活化，接种于试管斜面；

(2)将毒死蜱农药降解菌Hu-01的斜面种接种于查彼氏培养基摇瓶中，振荡培养至对数期；

(3)将(2)菌种按照8％～10％的接种量种入种子罐，培养至对数生长期；

(4)将到达对数期种子液按照8％～10％的接种量接种入生产罐培养；

(5)培养液经离心取上清得菌液，菌液立即加入保护剂，分装成液体剂型。

步骤(3)所述种子罐培养条件为无菌空气的通气量为45～60L/min，搅拌速度为200～300转/分，温度28℃。

步骤(3)种子罐所用的培养基配方为NaNO₃ 0.2％，K₂HPO₄ 0.1％，KCl 0.05％，MgSO₄ 0.05％，Fe₂(SO₄)₃ 0.001％，蔗糖3％，蛋白胨0.5％。

步骤(3)所述种子罐按容积量80％投料，投料完成后在1.1kg/cm³的压力、121℃条件下灭菌，冷却至28℃后备接种。