[发明专利]虎颜花的组织培养繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及虎颜花的繁殖栽培方法，具体来说是利用组织培养技术来繁殖虎颜花的方法。

背景技术

虎颜花(Tigridiopalma magnifica C.Chen)又名大蓬莲、熊掌等，野牡丹科虎颜花属唯一的单种属植物，主要分布在广东省阳春鹅凰嶂自然保护区一带，分布面积十分狭窄，同时由于生态环境的破坏、人为的过度采挖及其自然繁殖力的低下，数量极为稀少，是我国广东省特有的珍稀濒危植物，已被列进中国稀有濒危植物保护名录。

虎颜花叶片硕大，直径可达50厘米以上，叶形美观，耐阴性强，花蕾小巧玲珑，观赏价值高，是一种优良的观叶花卉，可作为高档观叶植物用于室内和庭园观赏。但是虎颜花在自然条件下主要依靠分株进行繁殖，繁殖的速度慢；而虎颜花在人工栽培时结实少，种子细小，难萌发，也达不到理想的繁殖效果。

发明内容

本发明的目的在于开发出一种能高效地繁殖虎颜花的方法。

我们通过植物组织细胞的全能性和植物组织培养技术，利用外植体的取材、消毒、培养，用这种方法培养的虎颜花的生根率达85％～95％，成活率在85％～95％，从而实现了本发明的目的。

本发明的虎颜花的组织培养繁殖方法，其特征包括以下的步骤：

(1)外植体诱导材料消毒和不定芽诱导：在生长季节选取生长旺盛虎颜花(Tigridiopalma magnifica C.Chen)的幼嫩叶片为外植体，冲洗干净后先用70％～75％的酒精浸泡10～30s，再用0.05％～0.2％升汞溶液或1％～2％的次氯酸钠溶液消毒5～10min，无菌水冲洗后切成小块，接种到培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天，培养形成不定芽，所述的培养基每升中含有6-苄基嘌呤5.0～10.0mg，萘乙酸0.5～1.0mg，蔗糖20～30g和琼脂5～7g，其余为MS，pH 5.5～5.8；

(2)不定芽继代增殖：将步骤(1)诱导出的不定芽切割后再继代培养于与步骤(1)相同的培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天，进行不定芽的增殖；

(3)生根培养：当芽高约2～3cm时，切下接种到生根培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天，培养至正常生根，所述的培养基每升中含有萘乙酸0.5～1.0mg，0.5～1g活性炭，蔗糖20～30g和琼脂5～7g，其余是1/2MS，pH 5.5～5.8，所述的1/2MS是将MS中的大量元素减半，其它成分不变而组成的培养基；

(4)试管苗移栽：当试管苗长至3～4cm时，在自然光照下炼苗7～10天，洗掉根部培养基，移栽到由沙、珍珠岩、泥炭土等量混合的基质中，喷雾保湿85％～95％、遮荫75％～85％、保温20～30℃培养。

步骤(1)中所述的无菌水冲洗次数为4～5次，所述的外植体切成小块的面积最好为1cm×1cm，为减轻褐化，先培养5～10天后再转入同前的新鲜培养基中，继续培养45～50天能在外植体上形成不定芽。

步骤(2)所述的一个继代增殖周期为30～40天，每1个继代增殖周期后的增殖倍数为3～5倍，能进行多次继代，继代10代后仍能保持增殖率。

步骤(3)所述的培养时间一般是30天，每株苗有根数4～8条，生根培养基中加入活性炭时有利于根的生长。

步骤(4)所述的移栽时间一般为30～40天可上盆栽培。

上述培养基中的MS为国际通用的培养基，所述的1/2MS是将MS中的大量元素减半，其它成分不变而形成的培养基，其成分和配制方法参看文献(谭文澄、戴策刚主编.观赏植物组织培养技术.北京：中国林业出版社，1991.)。

本发明采用植物组织培养技术能快速繁殖种苗，加速繁殖速度获得大量试管苗，投入少，产出高，虎颜花的生根率可达85％～95％，成活率可达85％～95％，并且方法简单实惠，应用价值高，出苗快，稳定性高，苗壮，种苗品质好，抗性强，生长良好，为满足种苗市场的需要提供一条有效的途径。

具体实施方式

以下的实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。

实施例1：