[发明专利]一种功能化微流控芯片及其用于PCR产物分析的方法有效
申请号: | 200710030809.9 | 申请日: | 2007-10-12 |
公开(公告)号: | CN101157952A | 公开(公告)日: | 2008-04-09 |
发明(设计)人: | 刘大渔 | 申请(专利权)人: | 广州阳普医疗用品有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12M1/34 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 | 代理人: | 李卫东;裘晖 |
地址: | 510370广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 功能 化微流控 芯片 及其 用于 pcr 产物 分析 方法 | ||
1.一种功能化微流控芯片,所述芯片由有4个储液池、分离通道和进样通道组成,其特征在于:所述的储液池分别为缓冲液池、缓冲液废液池、进样废液池和样品池,分离通道两端分别连接缓冲液池和缓冲液废液池,进样通道两端分别连接样品池和进样废液池;分离通道和进样通道重叠区域为有效进样通道;所述有效进样通道的长度范围是0.5~20厘米。
2.根据权利要求1所述的功能化微流控芯片,其特征在于:所述样品池和进样废液池位于分离通道的同侧或异侧。
3.根据权利要求1所述的功能化微流控芯片,其特征在于:所述集等速电泳预浓缩和分离功能的微流控芯片的材料是石英、玻璃、塑料或硅胶。
4.根据权利要求3所述的功能化微流控芯片,其特征在于:所述塑料为聚甲基丙烯酸甲酯或聚碳酸酯,所述硅胶为聚二甲基硅氧烷。
5.权利要求1所述的功能化微流控芯片用于PCR产物分析的方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)缓冲液引入芯片:通过压力将缓冲液引入功能化微流控芯片的分离通道、进样通道、缓冲液池、进样废液池和缓冲液废液池;
(2)在样品池加入PCR产物;
(3)进样:通过电进样或压力进样将PCR产物充满进样通道,对于电进样:在样品池和进样废液池之间施加电压,场强范围介于10V/cm~10000V/cm之间,施加电压时间为1~600秒;对于压力进样:以正压作用于样品池或以负压作用于进样废液池,压力作用时间为1~180秒;
(4)等速电泳浓缩、分离和检测:在缓冲液池和缓冲液废液池之间施加电压,场强范围介于50V/cm~2000V/cm之间,施加电压持续时间为30~600秒;有效分离长度即有效进样通道末端与检测器之间的距离为1~6cm,检测到的PCR产物信号经检测处理输出电泳图谱即可用于PCR产物分析。
6.根据权利要求5所述的功能化微流控芯片用于PCR产物分析的方法,其特征在于:所述PCR产物中的氯离子为前导离子,所述缓冲液含有尾随电介质和筛分介质,所述尾随电介质包括3-(N-吗啡啉)丙磺酸、N-(乙-羟乙基)哌嗪-N-2乙烷磺酸或N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸;所述DNA筛分介质包括羟丙纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚维酮、聚乙烯醇、聚乙二醇或聚丙烯酰胺中的一种或两种或者两种以上。
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