[发明专利]一种用于评价细胞生长因子促肿瘤生长安全性的检测方法无效
申请号: | 200710031054.4 | 申请日: | 2007-10-25 |
公开(公告)号: | CN101419222A | 公开(公告)日: | 2009-04-29 |
发明(设计)人: | 姚成灿;查振刚;吴昊;屠美 | 申请(专利权)人: | 暨南大学 |
主分类号: | G01N33/48 | 分类号: | G01N33/48;C12Q1/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 510632广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 评价 细胞 生长因子 肿瘤 生长 安全性 检测 方法 | ||
1、一种用于评价细胞生长因子促肿瘤生长安全性的检测方法,其特征在于:先测定待检测药物对细胞分裂和生长速度的影响;再CREB通路相关基因与蛋白的表达水平、磷酸化水平和DNA结合水平;最后检测克隆形成数量和肿瘤体积,结合所有检测结果综合判断的细胞生长因子促生长的可能性。
2、权利要求1中细胞分裂和生长速度的测定分别应用CFSE标记流式细胞术和[3H]掺入法。
3、权利要求1中含CREB通路相关基因与蛋白的表达水平、磷酸化水平和DNA结合水平分别应用实时定量RT-PCR技术、Western Blotting方法、流式细胞术染色质免疫沉降法。CREB通路相关基因与蛋白包括ATF1-3、CREB、CREM、CBP、Ep300、ICER、Elk1、GTF2b、Polr2a-c、Tbp等。
4、权利要求1中的克隆形成数量和肿瘤体积,分别应用软琼脂胶细胞培养和用皮下注射的方法将细胞注射到裸鼠体内的方法诱导克隆和肿瘤的形成,然后测定克隆形成数量和肿瘤体积。
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