[发明专利]一种二聚黄酮化合物及其制备方法和抗癌应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种二聚黄酮化合物，具体来说是一种二聚黄烷醇，还涉及该化合物的制备方法以及它在抑制癌细胞生长方面的应用。

背景技术

麻黄始载于《神农本草经》，列为中品，历代本草均有收载，具发表散寒、宣肺平喘、利水消肿等功效，用于风寒感冒、胸闷喘咳、风水浮肿、支气管哮喘等症。

麻黄中含有生物碱、黄酮、黄烷、鞣质、挥发油、有机酸和多糖等多种成分，但目前对其药理毒理作用研究较明确的只有生物碱类。

国内对麻黄黄酮的研究较少，麻黄黄酮类主要有：芹菜素、小麦黄素、山奈酚、芹菜素252鼠李糖苷、草棉黄素、32甲氨基棉黄素、山奈酚鼠李糖苷、无色飞燕草素、芦丁、白天竺秦苷、白花色甙、无色矢车菊素和槲皮素等。

麻黄药理作用广泛，已经有报道的作用有发汗、利尿、镇咳、平喘、抗过敏、升高血压、兴奋中枢神经系统、解热、抗病毒及影响神经肌肉传递等作用。近年来又发现麻黄具有对抗急性血淤症形成的作用，具有改善慢性肾功能衰竭的作用，具有促进脂肪细胞脂肪合成的作用，还具有清除氧自由基的作用。

发明内容

本发明的目的在于从麻黄科草麻黄(Ephedra sinica)中分离得到新的有抗癌活性的二聚黄酮化合物，另一目的是提供该化合物的制备方法，进一步的目的是开发它在抑制癌细胞生长方面的应用。

本发明从麻黄科草麻黄(Ephedra sinica)中分离得到新的二聚黄酮化合物二聚黄烷醇，该化合物有中等细胞毒性，对HeLa宫颈癌细胞、SGC-7901胃癌细胞、HepG2肝癌细胞三种肿瘤细胞株具有较明确的生长抑制作用，从而实现了本发明的目的。

本发明的二聚黄酮化合物由下述式(1)表示：

式(1)

本发明由式(1)表示的二聚黄酮化合物从麻黄科草麻黄(Ephedra sinica)中分离得到，其制备方法是以麻黄科草麻黄(Ephedra sinica)植物的根为原料，切碎后用甲醇或乙醇提取，最好提取3次，甲醇或乙醇提取物用水悬浮，加入石油醚脱脂，再用乙酸乙酯分液，得乙酸乙酯提取物，乙酸乙酯提取物经过正相硅胶快速层析，用体积比从100∶0～0∶100变化的氯仿-甲醇梯度洗脱，合并氯仿-甲醇体积比100∶10部分洗脱液，蒸干，正相硅胶快速层析，然后再用体积比100∶8的氯仿-甲醇洗脱，取其中的比移值为0.35的部分收集，蒸干得提取物，再用Sephadex LH-20，体积比1∶1氯仿-甲醇分离，收集淡黄色条带部分，蒸干，得式(1)表示的二聚黄酮化合物。

经实验证明本发明该二聚黄酮化合物有中等细胞毒性，对HeLa宫颈癌细胞、SGC-7901胃癌细胞、HepG2肝癌细胞三种肿瘤细胞株，其IC₅₀值均在10μg/mL左右，显示其对癌细胞具有较明确的生长抑制作用，可在治疗癌症尤其是宫颈癌、胃癌、肝癌中应用。

具体实施方式

以下的实施例是对本发明的进一步说明，但本发明不限于下述实施例。

实施例1：式(1)表示的二聚黄酮化合物的制备

取草麻黄根重20公斤，用10升乙醇回流提取3次，1000克乙醇提取物用5升水悬浮，加入5升石油醚脱脂，再用3升乙酸乙酯分液，得提物200克，提取物100g经过正相硅胶快速层析(装柱量500克硅胶，柱子直径10cm，硅胶粒径40μm，自然流速)，用体积比从100∶0～0∶100)氯仿-甲醇梯度洗脱，体积比100∶10部分洗脱液合并得7.8克，然后再用5升体积比100∶8的氯仿-甲醇洗脱，取其中的比移值为0.35的部分收集得330mg，再用Sephadex LH-20，体积比1∶1氯仿-甲醇洗脱分离(柱高60cm，柱直径1cm，自然流速)，收集淡黄色条带部分，蒸干，得黄色固体90mg。

由HREI-MS可知此化合物的m/z[M-H]⁺为539.0984，结合¹H和¹³C NMR谱，给出分子式为C₃₀H₂₀O₁₀。由¹H和¹³C NMR谱可以看出该化合物有2个对位取代的苯环，由其氢谱数据可见，7.52(2H，d，J＝8.7HZ)与6.87(2H，d，J＝8.7HZ)应为邻位偶合，8.52(2H，d，J＝8.5HZ)与6.94(2H，d，J＝8.7HZ)应为邻位偶合。5.99(1H，d，J＝2.0HZ)与5.93(1H，d，J＝2.0HZ)应为间位偶合。由其碳谱数据可见100.6是连接2个氧的季碳，177.7是酮基(见表1)。