[发明专利]一种天麻药材的鉴别方法

说明书

技术领域

本发明涉及天麻化学指纹图谱的构建方法及其在天麻鉴定中的应用。

背景技术

天麻是我国四大名贵中药材(冬虫夏草、人参、鹿茸)之一，具有平肝息风、止痉之功效，近年研究发现：天麻还具有增智、健脑、治疗老年性痴呆症、延缓衰老、抗炎、增强免疫功能、降血压，调整心率、增加心输出量等调节心血管的作用，而且毒副作用很小。天麻的主要有效成分是天麻素。天麻素含量高低是判断天麻质量的重要指标。由于野生天麻越来越少，以人工天麻冒充野生天麻，以假天麻冒充真天麻，以非道地天麻冒充道地天麻的事件时有发生。而天麻质量和真伪鉴定通常凭肉眼观察和经验判断。由于缺乏科学鉴定方法，有时甚至将质量最差的天麻判定为最好的天麻。如何高效地鉴定天麻的质量和真伪，特别是采用当今国际公认的鉴定中药质量的有效方法，目前还未见有关报道。因此，研究鉴定天麻质量和真伪的化学指纹图谱技术，并用于天麻鉴定具有十分重要的意义和应用价值。

发明内容

本发明旨在提供一种用天麻化学指纹图谱来对天麻的质量，真伪进行准确鉴别的方法。

本发明的目的是通过下述方式实现的：

本发明包括以下步骤：

(1)建立天麻的标准化学指纹图谱，方法如下：

a、将天麻标准品放入索氏提取器中；

b、加入70％乙醇，回流提取，用超声波细胞破碎器处理20-30min，超声波处理后称重，用相应的溶剂补足减失的重量；重复一次；过滤、浓缩、干燥后，用10％乙腈溶液定容；

c、用高效液相色谱仪、Eclipse、XD13-C₈色谱柱，10％乙腈溶液作流动相，221±1nm波长光测定天麻标准品的化学指纹图谱(图3)；

所述的天麻标准的化学指纹图谱中保留时间为1.920min是天麻素峰，其它各种天麻的天麻素峰与天麻标准品的最大偏差为1.9％；

(2)、按步(1)的方法测定待测天麻样品和天麻伪品的化学指纹图谱；并与(1)步的天麻标准化学指纹图谱对比鉴别天麻质量、道地性和真伪。

本发明b步中所述的回流提取为在95-100℃水浴中热回流15-25min。

本发明c步中采用的是25℃柱温，20μl进样量，1ml/min流速。

所述的天麻标准化学指纹图谱中有7个明显的峰，根据这些峰出现的先后将它们分别编号为1号峰保留时间为1.295min、2号峰为1.509min、3号峰为1.682min、4号峰为1.920min、5号峰为2.535min、6号峰为3.225min、7号峰为3.415min，其中1、2、4、5、7号峰为所有的天麻样本的共有峰。

天麻的化学指纹图谱中保留时间在1.908～1.939min之间的峰是天麻素峰。

还可以根据天麻素峰面积和其他化学成分峰面积的总和大小对天麻进行进一步鉴定，其中面积越大，其所含物质成分数量越多，其质量越高。

来自不同地区的天麻的化学指纹图谱具有不同的特征和不同数量的波峰，但是，它们在相同位置具有5个共有峰(峰1、2、4、5和7)，特别具有非常稳定的天麻素特征峰(峰4)，各种天麻的天麻素峰的保留时间在1.908～1.939min之间，与天麻标准化学指纹图谱的天麻素峰的最大偏差为1.9％。

来自同一个省区(云南)的天麻，无论是野生的还是人工种植的都具有十分相似的化学指纹图谱(见图9～11)。来自不同省区天麻的化学指纹图谱明显不同，如云南天麻、东北天麻和湖北天麻的化学指纹图谱明显不同于其他天麻。

天麻的有效化学成分有天麻素、天麻苷元、香草醛、香草醇、倍半萜类、嘌呤类等，其中天麻素是其特有的主要有效成分。根据天麻的天麻素的峰面积，计算其天麻素含量表明：不同地区天麻的天麻素含量差异很大，来自同一地区的野生天麻的天麻素含量比人工种植的天麻高，其他成分含量也高，质量好。

通过本发明的方法，观察和分析得到的不同天麻样本的化学指纹图谱的图形特征、共有峰的有无和多少，天麻素含量的高低，可用于天麻质量的鉴定，不同地区天麻的鉴别(即道地天麻的鉴别)；同一地区的野生天麻和人工天麻的鉴别；天麻有效成分天麻素含量的测定；天麻真伪的鉴别；以及用于发现天麻优良种群和最适种植地区。因而本发明是一种很好的国际通用研究鉴定天麻质量和真伪的方法，对天麻鉴定具有十分重要的意义和应用价值。