[发明专利]一种增强微生物疫苗免疫原性的免疫制剂

说明书

技术领域

本发明属生物技术领域，涉及增强微生物疫苗免疫原性的免疫制剂， 具体涉及一种β-葡聚糖寡糖-微生物疫苗免疫制剂。

技术领域

微生物疫苗包括微生物灭活疫苗和蛋白亚单位疫苗，在防治多种微生 物感染疾病中起着非常重要的作用。为了提高疫苗的免疫效果或改变疫苗 免疫应答的类型，往往在疫苗中加入佐剂。

疫苗的免疫效果往往需要一种与之相匹配的佐剂才能更好地发挥疫苗 抗感染的特性。目前国外已经试验的佐剂有100多种。常用的佐剂包括铝 胶、矿物油、灭活细菌和化学合成物质等，免疫佐剂的研究逐渐成为疫苗 研究的重要内容之一。经典的氢氧化铝佐剂是目前批准人用疫苗最常用的 佐剂，但很难满足现代各种新型疫苗的需要和发展。氢氧化铝佐剂具有高 效吸附水溶性抗原，缓慢释放不断刺激机体产生体液免疫，主要用于白喉、 破伤风、麻疹等疫苗。然而，氢氧化铝佐剂在注射部位缓慢释放抗原的效 应较低，对很多抗原效果不确实。此外，在研的佐剂还有矿物油、天然的微 生物产物或合成的微生物产物衍生物、皂苷类(Quil A，ISCOMs)。

不同来源的多糖或者寡糖具有很强的免疫调节作用，可通过与宿主细 胞特别是巨噬细胞和树突状细胞表面的受体相互作用并激活细胞的活性 产生免疫调节活性。香菇和灵芝作为食物和药物在中国被广泛的应用，最 近的研究发现从香菇和灵芝中提取的香菇多糖和灵芝多糖具有抗感染，抗 肿瘤和免疫调节等广泛的作用，这些作用的发挥是通过激活天然免疫应答 中的巨噬细胞和树突状细胞等以及增强细胞介导的免疫应答，但是天然多 糖的提取存在产量低、纯度不高等缺陷，在应用上存在一定的限制。

目前可以通过人工合成的方法获得具有药用作用的寡糖(“可作药物的 寡糖及其硫酸化产物和它们的制备方法及含该寡糖的药物组合物” 01136237.5宁君；孔繁祚；顾建新)。人工合成的香菇多糖和灵芝多糖的基 本结构单位β-葡聚糖寡糖，以β-(1→3)连接为主链，β-(1→6)连接为 侧链的寡糖及其类似物，该产品无毒性、无刺激性并具有良好的水溶性， 具有抗肿瘤、抗病毒如抗人类免疫缺损病毒(HIV)的作用，以及提高机 体天然免疫力的作用。人工合成寡糖具有合成容易，纯度高以及产量高的 优势。

发明内容

本发明的目的是提供一种有效增强微生物疫苗免疫原性的免疫制剂。 具体涉及一种β-葡聚糖寡糖-微生物疫苗免疫制剂。

本发明采用β-葡聚糖寡糖和微生物疫苗制成免疫制剂，其中，β-葡 聚糖寡糖：微生物疫苗为25-100:1。

所述的β-葡聚糖寡糖为药用级人工合成β-葡聚糖寡糖 (01136237.5)，是以β-(1→3)连接为主链，β-(1→6)连接为侧链的寡 糖及其类似物。

所述的微生物疫苗是灭活微生物疫苗、蛋白疫苗或亚单位疫苗，尤其 是经非消化道注射的疫苗。

本发明将人工合成的β-葡聚糖寡糖作为免疫佐剂，与灭活疫苗或蛋 白疫苗或亚单位疫苗联合制成免疫制剂，能明显增强疫苗的稳定性和免疫 原性。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

采用人工合成的寡糖[β-(1→3)连接为主链，β-(1→6)连接为侧链] 与微生物疫苗按25-100:1比例配制，制备成人工合成的β-葡聚糖寡糖- 疫苗免疫制剂。

本发明人工合成β-葡聚糖寡糖-疫苗免疫制剂其中所述的β-葡聚糖 寡糖的浓度可根据不同疫苗进行调节。

本发明所述的人工合成的β-葡聚糖寡糖的优点是其合成相对容易，产 量高而且纯度高，而且人工合成的寡糖的可修饰性，可以根据需要对合成 的寡糖进行修饰。同时人工合成β-葡聚糖寡糖将灭活疫苗蛋白连接，具 有独特的增强疫苗免疫原性的佐剂作用，可诱导全身免疫应答，特别是诱 导有效的TH2类免疫应答，产生高滴度的中和抗体。

附图说明

图1是免疫小鼠血清抗乙型肝炎病毒表面抗原的抗体效价图。

图2是免疫小鼠脾脏淋巴细胞特异性刺激后Th1和Th2类细胞因子 的分泌图，

其中：PBS＝磷酸缓冲液，G＝β-葡聚糖，H＝HBsAg，F＝福氏佐剂。

具体实施方式

实施例1

制备人工合成β-葡聚糖寡糖-HBsAg蛋白疫苗免疫制剂